Обнаружены кокки в мазке что это значит: Кокки в мазке — причины, симптомы, лечение

что это такое, как диагностируется и лечится

Посещать докторов не любит большая часть людей. Но все мы прекрасно понимаем, что без этого не обойтись, все мы периодически болеем, и поэтому без помощи специалиста нам не справиться. Иногда, в независимости от наших желаний, нам в случае развития того или иного заболевания приходится сдавать анализы. Довольно часто назначается сдача мазка. Многие часто задаются вопросом: «Что это такое, кокки в мазке?». Об этом и пойдет речь в статье.

Нас окружает много различных микроорганизмов. Это и бактерии и вирусы и грибы. В повседневной жизни мы не обращаем на подобную микрофлору никакого внимания. Но до определенного момента, пока она не проникнет в организм. Одна из самых вредных и провоцирующих серьезные заболевания флор — кокковая. Под кокками подразумеваются бактерии, обладающие шарообразной формой и поражающие в большинстве случаев ЖКТ, дыхательную и половую систему. Эти микроорганизмы могут обнаружиться в организме как женщины и мужчины, так и ребенка. Нередко люди задаются вопросом, как выглядят кокки в мазке — что это такое вообще, и как с этим бороться. Обнаружение этих паторганизмов в мазке — новость не из приятных.

Весьма распространенной и вместе с этим довольно болезненной является стафилококковая инфекция. Вызвать ее может несколько микроорганизмов. Согласно статистическим данным, практически каждый новорожденный инфицируется стафилококком, но остается он в организме лишь у двадцати процентов населения планеты, 60% людей являются периодическими носителями стафилококка.

Когда речь идет о стафилококковой флоре, то имеется в виду золотистый стафилококк. Он на самом деле опасен, потому как устойчив как к антисептическим, так и антибактериальным препаратам. Он может спровоцировать развитие серьезных патологий. Эти микроорганизмы весьма активны и чрезвычайно устойчивы к воздействию извне. Так, к примеру, они могут сохранять активность после длительного воздействия ультрафиолета, температуры в 150 градусов.

Их нельзя уничтожить ни при помощи спирта, ни при помощи натрия хлорида или перекиси. Данная бактерия может спровоцировать развитие опасных недугов, в частности пневмонии, эндокардита, остеомиелита. Она же может привести к смерти. Нередко паторганизм поражает половую систему.

Наличие кокков в небольшой концентрации считается нормой. Это значит, что единичный стафилококк не опасен. Увеличение количества стафилококков требует незамедлительного лечения. Нередко в мазке на кокки обнаруживается еще один вид флоры — стрептококк. Иначе его называют грамположительной бактерией. Частое явление — выявление энтерококков. Эти микроорганизмы устойчивы к любым воздействиям, а их выявление сигнализирует о наличии воспалительного процесса в половой или мочеполовой системе.

Гонококк считается одним из самых болезнетворных представителей кокковой микрофлоры. Грамотрицательные бактерии могут провоцировать развитие различных патологий, в частности гонореи. Эта флора является исключительно патогенной. Это означает, что в мазке ее быть не должно. Вылечить патологию, вызванную кокковой флорой можно только с помощью антибактериальных препаратов.  Терапией недуга, так же как и постановкой диагноза, может заниматься исключительно лечащий врач.

Заниматься самолечением, особенно при беременности, принимать какие-либо препараты, применять свечи категорически не рекомендуется. Так вы только навредите себе и усугубите состояние. Наличие палочек Додерлейна — вполне естественно. Эти бациллы поддерживают нормальную кислотную среду влагалища, а также противостоят различным инфекциям. Кокки в мазке, что это такое вам уже известно, могут спровоцировать развитие серьезной патологии. С целью предупреждения развития плачевных последствий врачи назначают забор мазка.

Флора влагалища позволяет сделать выводы относительно отсутствия или наличия патогенных микроорганизмов, к примеру, дрожжеподобных грибов рода Кандида, провоцирующих развитие кандидоза. Помимо этого, по результатам исследования можно определить наличие или отсутствие раковых клеток. Мазок является совершенно бесплатной манипуляцией. Результаты исследования покажут, есть ли какие нарушения в функционировании женской половой системы.

Мазок на флору и стерильность: что показывает?

Данное исследование способствует выявлению патогенной микрофлоры, провоцирующей возникновение различных болезней. Результат мазка на флору в 95% (показатель количества лактобактерий) сигнализирует о том, что здоровье женщины в порядке. Падение количества полезных бактерий сигнализирует об ослаблении защиты.

От концентрации во влагалище лактобактерий будет зависеть степень чистоты влагалища, всего их существует четыре:

  1. Первая степень говорит об отличном состоянии половой системы. В данном случае должно обнаружиться преобладающее количество палочек Додерлейна. Иногда выявляется наличие эпителиальных клеток (в малой концентрации), а также лейкоцитов.
  2. Что относительно второй степени, то она должна вызывать некую обеспокоенность. Помимо лактобактерий, обнаруживается наличие грамотрицательных организмов, которые могут спровоцировать появление патологии.
  3. Третья степень характеризуется наличием большого количества эпителиальных клеток, а также пагубной микрофлоры и практически полным отсутствием палочек Додерлейна. Это плохой результат. Лечение должно быть незамедлительным.
  4. Что касается четвертой степени, то она является критической. В мазке не обнаруживаются лактобактерии. Реакция мазка щелочная. Всю флору составляют патогенные организмы. Терапия должна быть серьезной и незамедлительной.

Виновниками выявленного во влагалище воспаления чаще всего являются коккобациллы — трихомонады или гарднереллы. Теперь вы знаете, что такое кокки в мазке, и самое главное вы знаете, как с этим бороться.

Обильная кокковая флора в мазке: симптомы и норма

Как уже упоминалось, в человеческом организме содержится значительное количество микроорганизмов. Кокки составляют условно-патогенную микрофлору. Они являются безвредными только в случае поддержания правильного баланса. Обильная кокковая флора в мазке может сигнализировать о серьезных проблемах со здоровьем.

В микрофлоре влагалища содержатся ацидофильные бактерии, некое количество бифидобактерий — 10% и пептострептококков — примерно 5%. Такая кокковая флора в мазке в такой концентрации считается вполне нормальной. В таком составе микрофлора продуцирует кислую среду, способствующую предотвращению различных патологий. Более того, такая флора способствует защите не только слизистых оболочек влагалища, но и всего организма.

Полезная микрофлора помогает в:

  • поддержании кислотного баланса;
  • уничтожении вредной микрофлоры;
  • нормализации обменных процессов.

Если после проведения лабораторного исследования обнаружено, что кокковая флора в мазке превышает норму, это свидетельствует о повышенном уровне щелочи. При превышении микрофлорой нейтрального результата появляются грамположительные диплококки. В данном случае происходит снижение концентрации лактобактерий. Если же среда влагалища чрезмерно щелочная, отмечается гибель ацидофильных лактобактерий, а впоследствии замещение их кокками.

Обильная кокковая флора в мазке сигнализирует о развитии дисбактериоза влагалища, или же о наличии воспаления.

При игнорировании проявлений недуга, кокки начинают активно развиваться, а это в дальнейшем приводит к возникновению серьезных патологий, в частности эрозии шейки матки. Общеизвестно, что вышеуказанный недуг является причиной бесплодия. Крайне не желательно обильное выявление кокковой флоры в мазке при беременности, потому как это усложняет процесс вынашивания плода. Выявление обильной кокковой флоры в мазке может сигнализировать о серьезных проблемах.

Проникновение и размножение вредной флоры в большинстве случае происходит вследствие:

  • несоблюдения гигиены;
  • понижения иммунитета;
  • длительного приема антибиотиков;
  • ношения тесного синтетического белья;
  • частого проведения спринцеваний;
  • незащищенных половых связей.

Очевидным симптомом заселения обильного количества кокков является появление слишком выраженного неприятного запаха. Он схож с запахом испорченной рыбы. Помимо этого, часто поступают жалобы на появление зуда и жжения наружных половых органов, вагинальных выделений желтоватого окраса, ощущения дискомфорта после полового контакта.

У мужчин довольно редко возникают проявления заселения кокковой флоры. Однако может быть и такое, что мужчина жалуется на появление болевых ощущений в момент мочеиспускания, жжения и зуда, выделений из пениса желтой или зеленой окраски. Эти симптомы могут сигнализировать о гонококках или трихомонадах. Эти патологические организмы являются возбудителями патологий, передающихся ПП.

Важно также понимать, что обильная концентрация кокковой флоры в мазке — это уже повод задуматься над своим здоровьем и начать лечение. Однако помните о том, что терапия подбирается в зависимости от вида кокковой флоры в мазке. Заниматься самолечением не стоит. Прием того или иного препарата может назначить только врач и исключительно после расшифровки результатов анализов.

Кокки в мазке: чем лечить у женщин, мужчин, а также при беременности и у детей

Терапия патологии должна быть целесообразной и своевременной. Не стоит спрашивать: «Чем лечить кокки в мазке?» в интернете. Назначить терапию может только гинеколог. Врач назначит лечение после проведения необходимых обследований. Одно из самых основных — мазок на микрофлору. При нормальном состоянии здоровья в мазке обнаруживается небольшое количество кокков.

При наличии недуга в мазке помимо огромного количества кокков будут содержаться и другие инфекционные возбудители. Лечиться в любом случае должны оба партнера. Как правило, назначается применение антибиотиков: Метронидазола, Клиндамицина, препаратов, способствующих укреплению иммунной системы, антигистаминных средств. Если женщина беременна, назначают безопасные средства, не влияющие на развитие плода. О том, чем лечить кокки в мазке, спросите специалиста.

Важно

Не стоит также, если обнаружены кокки в мазке, лечить чем-то из нетрадиционных средств. Народные средства при нецелесообразном использовании могут навредить.

Теперь вы знаете, что делать, если выявлены кокки в мазке, чем лечить патологию. После курса терапии, а также полного восстановлении микрофлоры влагалища (должна преобладать палочка Додерлейна) вам остается только лишь придерживаться ряда рекомендаций, чтобы не заболеть снова.

  1. Соблюдайте гигиену.
  2. Носите белье из качественных натуральных материалов.
  3. Избегайте незащищенных половых контактов.
  4. Правильно питайтесь.
  5. Вовремя лечите сопутствующие патологии.

Берегите себя, заботьтесь о своем здоровье и тогда у вас не будет поводов обращаться в больницу.

Кокки в мазке — Обнаружены кокки в мазке, лечение и профилактика

Последнее обновление — 12 июня 2017 в 13:16

Время на чтение: 5 мин

Что же делать, если после посещения доктора и прохождения лабораторной диагностики у Вас в мазке обнаружены кокки? Как с ними бороться? И не забывайте, что также могут быть кокки в мазке у мужчин, а не только у женщин.

Кокки и их виды

Палочки кокки – микроскопические организмы, которые живут в человеческом теле. Они бывают как полезными, так и вредными. Нужно помнить, что есть такие понятия, как условно-патогенная и патогенная кокковая микрофлора. То есть, палочки бактерии кокки полезны только тогда, когда их популяция не превышает определенного количества.

Бактерии кокки бывают разных видов. Рассмотрим основные виды этих микроорганизмов, и заболевания, которые они могут вызвать:

  1. Стрептококки – являются причиной дисбактериоза влагалища и воспалительных процессы в половых органах;
  2. Энтерококки – относятся к микроорганизмам кишечной микрофлоры, потому их присутствие говорит о не соблюдении правил личной гигиены. Если обнаружены эти микроорганизмы, пациент должен пройти обязательный курс лечения;
  3. Коккобациллы – гемофильная палочка, гарденерелла и хламидии. Все эти бактерии сигнализируют о присутствии болезней, передающихся половым путем. Еще из-за этих бактерий может возникнуть такое заболевание, как бактериальный вагиноз. Если обнаружены Коккобациллы – больному нужно провести диагностику крови и мочи, для постановки точного диагноза;
  4. Гонококки – провоцируют цервицит и сальпингит. А также другие воспаления;
  5. Диплококки – нарушают вагинальную микрофлору. Являются причинами менингококка и пневмококка;
  6. Стафилококки – провоцирует расстройства мочеполовой системы организма. В некоторых случаях у пациента берут дополнительный мазок из зева и носа.

Нормальное количество кокков в мазке

В вагинальной микрофлоре у женщин содержится много бактерий, причем каждая из них выполняет свою работу и поддерживает женское здоровье. Такие микроорганизмы включают в себя: ацидофильные бактерии, бифидумбактерии и кокки. Если их соотношение в пределах нормы – они поддерживают щелочной баланс, помогают правильно протекать обмену веществ и уничтожают чужеродные микроорганизмы.

Чтобы определить, количество бактерий, содержащихся в микрофлоре, нужно сделать мазок на щелочной баланс. Если количество микроорганизмов больше нормы – это информирует о том, что в микрофлоре повышенная щелочная среда, то есть pH больше 7,5.

Норма pH – не более 7, и не менее 5,5. Нарушенный баланс кокков у женщин приводит к заболеванию эрозией шейки матки, ендометритом и даже к бесплодию.

Симптомы чрезмерного количества кокков в организме

Увеличение количества кокковой инфекции в организме вызывает определенные симптомы. Кокки могут себя обнаруживать тем, что выделения из половых органов начинают неприятно пахнуть, появляется зуд, мочеиспускание становится болезненным. Обычные вагинальные выделения меняют свой цвет. Во время полового акта появляются неприятные ощущения.

Нужно помнить, что эти симптомы наблюдаются и при других заболеваниях. Поэтому, чтобы поставить точный диагноз, необходимо пойти к доктору и сделать лабораторную диагностику.

Причины

Если кокки в мазке все же обнаружили – на это есть определенные причины. Если Вы нарушаете схему приема антибиотиков – это влияет на микрофлору, в том числе может спровоцировать быстрое размножение кокков.

Спровоцировать дисбаланс может также нерегулярная гигиена половых органов. Можно «добавить» кокки в организм, занимаясь сексом, особенно незащищенным, с разными партнерами.

Провоцирует беспорядочное размножение микроорганизмов ношение белья не по раз меру, а также его воздухонепроницаемости (если белье синтетическое).

При раннем начале половой жизни микрофлора подростка еще не успевает «стабилизироваться», что также приводит к повышению уровня кокков. Еще факторы риска – гормональный дисбаланс и ослабление иммунитета.

Помните, чем крепче Ваше здоровье в общем, тем меньше вероятность развития патогенной микрофлоры.

Профилактика

Для того, чтобы кокки бактерии в мазке не были обнаружены, нужно придерживаться простых принципов. Перед приемом антибиотиков, нужно обязательно проконсультироваться с доктором, чтобы он назначил безопасную дозировку. Мыться нужно каждый день. Белье менять ежедневно. Правильней иметь одного полового партнера, чем нескольких одновременно. Это обезопасит Вас от различных заболеваний. При половом акте, самое надежное средство от вирусов и бактерий – презерватив. Спринцевание применять только по назначению врача – так как оно нарушает микрофлору. Первый половой акт должен быть только после полного физического созревания. Нужно внимательно наблюдать за своим гормональным фоном, регулярно проходить лабораторную диагностику.

Поддерживайте иммунитет.

Лечение кокков у женщин

Если Вы почувствовали первые неприятные симптомы – нужно обращаться к гинекологу для точной диагностики, и постановки правильного диагноза. У женщин обычно берут мазки из влагалища, уретры и канала шейки матки. Перед взятием анализа нельзя спринцеваться.

К сожалению, в мазке у женщин, довольно часто обнаруживают повышенное количество кокков. Как лечить кокки? При терапии обычно назначают антибиотики. Они уничтожают зловредные микроорганизмы внутри человека. Также применяют вагинальные свечи, чтобы они боролись с микроорганизмами непосредственно во влагалище. Вместо свеч лечащий врач может прописать спринцевание или определенные тампоны, пропитанные специальными лечебными веществами. И обязательно – витамины, которые будут поддерживать иммунитет. После курса терапии нужно будет еще пройти лечение пробиотиками, которые восстановят нарушенный баланс микроорганизмов.
Если обнаружены кокки, также можно выбрать лечение народными средствами. Можно делать спринцевания с отварами ромашки, чистотела и календулы. Помните, что раствор для спринцевания должен быть теплым.

Не забывайте, что во время терапии кокков нельзя жить половой жизнью, потому что иначе Вы с партнером будете передавать микроорганизмы друг другу, и все лечение сойдет на «нет».

Лечение кокков у мужчин

Мужчины обычно не любят ходить к врачам, особенно к урологу. Но если у мужчины, или его партнерши обнаружили кокки, к доктору все-таки придется сходить. Перед сдачей мазка на выявление кокков, нужно не мочиться два часа. В течение суток не пить спиртных напитков и не принимать острую пищу, никаких медикаментов.
При осмотре мужчин берется мазок из уретры, для того, чтобы выявить кокки. При взятии мазка применяют одноразовый зонд, который вводится в уретру на глубину четырех сантиметров. Процесс хоть и вызывает неприятные ощущения, но безболезненный. Не бойтесь этого анализа, поскольку он поможет определить наличие не только кокков, но и других возможных инфекций в организме.

Принцип терапии кокков у мужчин, такой же как и у женщин. Все те же антибиотические препараты и ректальные свечи. В случае у мужчин, медикаменты будут влиять на микроорганизмы через кишечник. И, как всегда, обязательно – витамины.

Лечение кокков у ребенка

Данным заболеванием дети болеют довольно редко. Но нужно быть внимательными. Если Вы обнаружили у ребенка покраснение на половых органах, или необычные выделения, необходимо обратиться к детскому гинекологу или педиатру.

Если в результате лабораторной диагностики у ребенка обнаружили кокки – ему тоже назначат лечение при помощи антибиотических препаратов. Вместо свеч – ванночки и подмывание два раза в день с растворами необходимых лекарств.

Итог

Опасность нарушить микрофлору, и тем самым, спровоцировать бесконтрольное деление микроорганизмов, довольно велика. Поэтому нужно регулярно посещать врача для своевременной диагностики возможных заболеваний. И не забывайте, что если Вы будете здоровы – это окажет положительное влияние на все стороны Вашей жизни.

Бесплатные консультации врачей онлайн

Вопрос создается. Пожалуйста, подождите…

Только зарегистрированные пользователи могу задавать вопрос.
Зарегистрируйтесь на портале, задавайте вопросы и получайте ответы от квалифицированных специалистов!

Напоминаем, что стоимость публикации вопроса — 10 бонусов.

Зарегистрироваться
Как получить бонусы

К сожалению, у вас недостаточно бонусов для оплаты вопроса.
Напоминаем, что стоимость публикации вопроса — 10 бонусов.

Как получить бонусы

Раздел медицины*:
— Не указано —КоронавирусАкушерствоАллергология, иммунологияАнестезиологияВенерологияВертебрологияВетеринарияГастроэнтерологияГематологияГепатологияГериатрияГинекологияГирудотерапияГомеопатияДерматологияДиетологияИглотерапия и РефлексотерапияИнфекционные и паразитарные болезниКардиологияКардиохирургияКосметологияЛабораторная и функциональная диагностикаЛечение травмЛогопедияМаммологияМануальная терапияМРТ, КТ диагностикаНаркологияНеврологияНейрохирургияНетрадиционные методы леченияНефрологияОбщая хирургияОнкологияОстеопатияОториноларингологияОфтальмологияПедиатрияПлазмаферезПластическая хирургияПодологияПроктологияПсихиатрияПсихологияПсихотерапияПульмонология, фтизиатрияРадиология и лучевая терапияРеабилитологияРеаниматология и интенсивная терапияРевматологияРепродукция и генетикаСексологияСомнологияСпортивная медицинаСтоматологияСурдологияТерапияТравматология и ортопедияТрансфузиологияТрихологияУЗИУльтразвуковая диагностикаУрология и андрологияФармакологияФизиотерапияФлебологияЧелюстно-лицевая хирургияЭндокринологияЗатрудняюсь выбрать (будет выбрана терапия)

Кому адресован вопросВопрос адресован:
ВсемКонсультантам

Консультант, которому задается вопрос:
Всем. ..Агабекян Нонна Вачагановна (Акушер, Гинеколог)Айзикович Борис Леонидович (Педиатр)Акмалов Эдуард Альбертович (Аллерголог, Врач спортивной медицины)Александров Павел Андреевич (Венеролог, Гепатолог, Инфекционист, Паразитолог, Эпидемиолог)Александрова Анна Михайловна (Педагог, Психолог, Психотерапевт)Али Мохамед Гамал Эльдин Мансур (Педиатр)Аристова Анастасия Михайловна (Андролог, Уролог, Хирург)Армашов Вадим Петрович (Хирург)Афанасьева Дарья Львовна (Кардиолог, Терапевт)Беляева Елена Александровна (Гинеколог, Невролог, Рефлексотерапевт)Бушаева Ольга Владимировна (Пульмонолог, Терапевт)Врублевская Елена (Педиатр)Гензе Ольга Владимировна (Генетик, Педиатр)Горохова Юлия Игоревна (Венеролог, Врач общей практики, Дерматолог)Григорьева Алла Сергеевна (Врач общей практики, Терапевт)Демидова Елена Леонидовна (Психолог, Психотерапевт)Денищук Иван Сергеевич (Андролог, Уролог)Димина Тамара Олеговна (Акушер, Аллерголог, Ангиохирург)Довгаль Анастасия Юрьевна (Маммолог, Онколог, Радиолог)Долгова Юлия Владимировна (Педиатр)Дьяконова Мария Алексеевна (Гериатр, Терапевт)Загумённая Анна Юрьевна (Врач спортивной медицины, Гирудотерапевт, Диетолог, Косметолог, Терапевт)Зверев Валентин Сергеевич (Ортопед, Травматолог)Згоба Марьяна Игоревна (Окулист (Офтальмолог))Зинченко Вадим Васильевич (Рентгенолог, Хирург)Зорий Евген Владимирович (Невролог, Психолог, Терапевт, Хирург)Извозчикова Нина Владиславовна (Гастроэнтеролог, Дерматолог, Иммунолог, Инфекционист, Пульмонолог)Илона Игоревна (Врач общей практики, Гастроэнтеролог, Терапевт, Эндокринолог)Калявина Светлана Николаевна (Акушер, Гинеколог)Калягина Екатерина (Другая специальность)Карпенко Алик Викторович (Ортопед, Травматолог)Касимов Анар Физули оглы (Онколог, Хирург)Киреев Сергей Александрович (Психиатр, Психолог, Психотерапевт)Кирнос Марина Станиславовна (Стоматолог, Стоматолог детский, Стоматолог-терапевт)Копежанова Гульсум (Акушер, Гинеколог)Кравцов Александр Васильевич (Нарколог, Психиатр)Красильников Андрей Викторович (Врач ультразвуковой диагностики, Медицинский директор, Флеболог, Хирург)Кряжевских Инна Петровна (Терапевт, Гастроэнтеролог)Кудряшова Светлана Петровна (Эндокринолог)Куртанидзе Ираклий Малхазович (Окулист (Офтальмолог))Кущ Елена Владимировна (Диетолог, Терапевт)Лазарева Татьяна Сергеевна (ЛОР (Оториноларинголог))Лаптева Лариса Ивановна (Невролог)Лебединская Татьяна Александровна (Психолог, Психотерапевт)Ледник Максим Леонидович (Венеролог, Дерматолог)Леонова Наталья Николаевна (Детский хирург)Литвиненко Станислав Григорьевич (Ортопед, Травматолог)Лямина Ирина Алексеевна (Акушер)Максименко Татьяна Константиновна (Инфекционист)МАЛЬКОВ РОМАН ЕВГЕНЬЕВИЧ (Диетолог, Остеопат, Реабилитолог)Мамедов Рамис (ЛОР (Оториноларинголог))Мартиросян Яков Ашотович (Детский хирург, Проктолог, Травматолог, Уролог, Хирург)Маряшина Юлия Александровна (Акушер, Венеролог, Врач ультразвуковой диагностики, Гинеколог, Педиатр)Матвеева Ярослава Дмитриевна (Педиатр)Мершед Хасан Имадович (Вертебролог, Нейрохирург)Миллер Ирина Васильевна (Невролог)Мильдзихова АЛЬБИНА Бексолтановна (Врач общей практики, Гинеколог, ЛОР (Оториноларинголог), Педиатр, Терапевт)Муратова Наталья Сергеевна (Врач общей практики, Диетолог)Мухорин Виктор Павлович (Нефролог)Наумов Алексей Алексеевич (Мануальный терапевт)Никитина Анна Алексеевна (Окулист (Офтальмолог))Ольга Викторовна (Невролог, Неонатолог, Педиатр, Реабилитолог, Терапевт)Павлова Мария Игоревна (Стоматолог, Стоматолог-хирург, Челюстно-лицевой хирург)Панигрибко Сергей Леонидович (Венеролог, Дерматолог, Косметолог, Массажист, Миколог)Пантелеева Кристина Алексеевна (Невролог)Пастель Владимир Борисович (Ортопед, Ревматолог, Травматолог, Хирург)Паунок Анатолий Анатольевич (Андролог, Уролог)Першина Наталия Сергеевна (Невролог)Прокофьева Анастасия Михайловна (ЛОР (Оториноларинголог))Прохоров Иван Алексеевич (Нейрохирург, Хирург)Пушкарев Александр Вольдемарович (Гинеколог, Психотерапевт, Реабилитолог, Репродуктолог (ЭКО), Эндокринолог)Пьянцева Екатерина Вячеславна (Педиатр)Радевич Игорь Тадеушевич (Андролог, Венеролог, Сексолог, Уролог)Сапрыкина Ольга Александровна (Невролог)Свечникова Анастасия Евгеньевна (Стоматолог, Стоматолог детский, Стоматолог-ортопед, Стоматолог-терапевт, Стоматолог-хирург)Семений Александр Тимофеевич (Врач общей практики, Реабилитолог, Терапевт)Сергейчик Никита Сергеевич (Анестезиолог, Гомеопат)Силуянова Валерия Викторовна (Акушер, Врач ультразвуковой диагностики, Гинеколог)Соболь Андрей Аркадьевич (Кардиолог, Нарколог, Невролог, Психиатр, Психотерапевт)Сошникова Наталия Владимировна (Эндокринолог)Степанова Татьяна Владимировна (ЛОР (Оториноларинголог))Степашкина Анастасия Сергеевна (Гематолог, Пульмонолог, Терапевт)Сурова Лидия (Гирудотерапевт, Невролог, Терапевт)Суханова Оксана Александровна (Клинический фармаколог, Психолог)Сухих Данил Витальевич (Психиатр)Тумарец Кирилл Михайлович (Врач лечебной физкультуры, Врач спортивной медицины, Кинезитерапевт, Реабилитолог, Физиотерапевт)Турлыбекова Венера Равильевна (Врач общей практики, Педиатр)Устимова Вера Николаевна (Гематолог, Терапевт, Трансфузиолог)Фатеева Анастасия Александровна (Гастроэнтеролог, Диетолог, Психотерапевт, Эндокринолог)Федотова Татьяна Владимировна (Врач ультразвуковой диагностики, Гематолог, Терапевт)Фоминов Олег Эдуардович (Сексолог)Фоминов Олег Эдуардович (Сексолог)Фурманова Елена Александровна (Аллерголог, Иммунолог, Инфекционист, Педиатр)Хасанов Эльзар Халитович (Андролог, Врач ультразвуковой диагностики, Онколог, Уролог, Хирург)Хасанова Гульнара Сунагатулловна (Акушер, Врач ультразвуковой диагностики)Чупанова Аида (Акушер, Гинеколог)Швайликова Инна Евненьевна (Окулист (Офтальмолог))Шибанова Мария Александровна (Нефролог, Терапевт)Щепетова Ольга Александровна (Терапевт)Ягудин Денар Лукманович (ЛОР (Оториноларинголог))Ярвела Марианна Юрьевна (Психолог)

Описание проблемы:

Пол:
—укажите пол—ЖенщинаМужчина

Возраст:

В мазке обнаружены кокки: что это значит, виды

Виды кокков в мазке

В мазке может быть представлено широкое видовое разнообразие микроорганизмов. Так, несмотря на то, что кокки относятся к условно-патогенным формам микроорганизмов, процентное соотношение которых не превышает 3-4%, видовое разнообразие их очень широкое, насчитывает свыше 28 видов в каждом из биотопов. Рассмотрим основных представителей, которые встречаются во всех биотопах, являются универсальными.

Пептострептококки являются строгими анаэробными грамположительными формами микроорганизмов, которые часто встречаются в очень высоких концентрациях в организме здорового взрослого человека. Они практически отсутствуют в биотопах младенцев, которые находятся на грудном вскармливании. Их часто выделяют из источников инфекции при септицемиях, остеомиелитах, гнойных артритах, аппендицитах, гингивитах, пародонтозах и других заболеваниях.  Сбраживают углеводы с образованием широкого спектра кислот и газа.

Пептококки представляют собой сферические клетки небольшого размера, диаметр которых не превышает 1,2 мкм. Расположены парами, тетрадами, группами или короткими цепочками, грамположительные, неподвижные, неспорообразующие.

Являются хемоорганотрофами с метаболизмом бродильного типа, требуют обогащенных питательных сред. Углеводы не сбраживают, разлагают пептон с образованием водорода. Концентрация пептококков в биотопах человека в нормофизиологических условиях незначительная. При условии возрастания популяции, пептококки являются этиологическим фактором развития инфекционно-воспалительного процесса.

Энтерококки – основные представители биотопа толстой кишки. Морфологически все представители рода очень сходны между собой. Клетки овальной или сферический формы. Все они являются факультативными анаэробами, хемоорганотрофы с метаболизмом бродильного типа. Сбраживают различные углеводы с образованием в качестве главного продукта брожения молочной кислоты. Каталазонегативные, растут при температуре в пределах от 10 до 45 градусов. Отличаются от стрептококков высокой резистентностью по отношению к желчи и хлориду натрия.

Дифференциальными признаками, которые позволяют отличить их от других кокков, а также от стрептококков, является способность к размножению при температуре от 10 до 45 градусов, устойчивость к высоким концентрациям хлорида натрия, устойчивость к пенициллину, кислой среде.

До недавнего времени энтерококки рассматривались исключительно как симбионты кишечника человека, но сегодня установлена их этиологическая роль в развитии инфекционной патологии. Кроме того, они являются постоянными обитателями и других биотопов, таких как ротовая полость, влагалище, уретра. Отличаются высокой устойчивостью по отношению к антибактериальным препаратам, которая имеет тенденцию к постоянному, неуклонному росту.

Грамположительные кокки в мазке

Грамположительные кокки – это округлые или сферические микроорганизмы, которые при окраске по методу Грамма дают положительный результат. Являются нормальными представителями микрофлоры, но при неблагоприятных условиях, могут стать возбудителями многих инфекционных заболеваний.

Чаще всего они становятся причиной развития заболеваний печени, почек, крови, брюшной полости и половых органов, мягких тканей и слизистых оболочек. Вызывают послеоперационные осложнения, послеродовые инфекции, гнойно-воспалительные и септические заболевания новорожденных. Являются опасными внутрибольничными инфекциями, устойчивость которых все время прогрессирует.

Грамположительные микроорганизмы хорошо приспособлены к жизни в различных биотопах человеческого организма, а также владеют широким спектром факторов агрессии, что позволяет им при определенных условиях мигрировать во внешнюю среду организма, вызывая инфекционно-воспалительные заболевания, а у людей с иммунодефицитом – бактериемию, сепсис и септикопиемию. Известно, что в 21% случаев являются причиной неонатальной инфекции, почти половина из которой заканчивается летальным исходом. В 5-10% случаев являются возбудителями гинекологических заболеваний.

Известно, что под действием отдельных антибиотиков, многие грамположительные микроорганизмы могут повышать естественную способность к угнетению фагоцитоза и защите от иммуноглобулинов. Кроме того, клетки грамположительных кокков могут трансформироваться в резистентные L-формы, что позволяет им длительное время  персистировать в организме человека.

Многочисленными исследованиями доказано, что большинство случаев микроэкологических нарушений сопровождается увеличением уровня грамположительной микрофлоры. Особенно опасным являются такие изменения для новорожденных, поскольку в значительной степени возрастает опасность развития дефектных микробиоценозов, биопленок, ассоциаций с преобладанием условно-патогенной микрофлоры и измененными функциями. У новорожденных такие состояния отличаются высокой скоростью развития и быстро приводят к развитию бактериемии и сепсиса.

В 35% случаев бактериемия у новорожденных заканчивается летальным исходом. Учитывая постоянно увеличивающееся количество данных о роли грамположительных кокков как опасных нозокомиальных патогенов с возрастающей множественной лекарственной устойчивостью, агрессивный потенциал этих микроорганизмов нельзя недооценивать. Среди представителей грамположительной флоры, наиболее опасными являются стафилококк золотистый, синегнойная палочка и фекальный энтерококк.

Высокую опасность инфицирования связывают с повышенной резистентностью микроорганизмов по отношению к лекарственным препаратам. Быстрая мутация способствует ускоренному приобретению искусственной устойчивости, которая дополняет естественную. Не менее опасными являются и такие факторы вирулентности, как синтез цитолизинов. Очень значимым с точки зрения генетики микроорганизмов, является механизм защиты от иммунной системы хозяина. Описана способность к защите от нейтрофил-опосредованного фагоцитоза и киллинга, а также цитотоксическое действие на полиморфные нейтрофилы и макрофаги.

Способны защищаться от действия молекулярного кислорода и перекиси за счет синтеза определенных ферментов. Благодаря этим свойствам, могут достаточно длительное время персистировать в очаге поражения. Усиление происходит за счет наличия механизма получения, накопления и передачи внехромосомных элементов.

Таким образом, превышение в мазке грамположительной микрофлоры, выше физиологических норм, указывает на развитие дисбактериоза, что является опасным состоянием, которое требует лечения. Наиболее эффективными являются пробиотические препараты.

Грамотрицательные кокки в мазке

Грамотрицательные микроорганизмы в большинстве своем являются аэробными или факультативно-анаэробными представителями нормальной микрофлоры толстого кишечника. Но их можно обнаружить и в других биотопах. Отдельные представители способны синтезировать витамины, в частности, группы В и К, антибактериальные вещества, жирные кислоты. Однако при снижении популяции и ослаблении протекторных свойств облигатных микроорганизмов, их количество резко возрастает, в результате чего будут развиваться многочисленные патологические явления.

Микроорганизмы округлые, небольшого размера. Многие из них двигаются за счет перитрихиальных жгутиков. Имеют широкий спектр ферментативной активности. Способны сбраживать большое количество спиртов с образованием пирувата, который потом преобразуется в кислоты.

Одним из наиболее опасных осложнений, которые вызываются грамотрицательной флорой является способность этих микроорганизмов мигрировать, что сопровождается инфицированием паренхиматозных органов с развитием многочисленных экстраинтестинальных инфекций, таких как сепсис, менингит, пиелонефрит, перитонит и другие.

Следует отметить, что инфекционные осложнения, которые вызываются грамотрицательными формами на сегодня являются одной из наиболее серьезных проблем. Обычно это наблюдается при снижении колонизационной резистентности макроорганизма через уменьшение концентрации представителей облигатной микрофлоры и недостаточность иммунной системы. В таких условиях обычно увеличивается уровень аэробной популяции биоценоза и его агрессивные свойства, которые позволяют данной микрофлоре преодолевать барьер приэпителиального слоя и способствовать транслокации их клеток во внутреннюю среду организма. Процесс наблюдается при массивной антибиотикотерапии, химиотерапии, которые угнетают индигенную флору и способствуют селективной пролиферации бактерий с высокой лекарственной устойчивостью.

Грибы и кокки в мазке

Любой рост грибной микрофлоры происходит на фоне дисбактериоза, что неизбежно сопровождается увеличением одновременно и бактериальной микрофлоры. В первую очередь происходит активный рост кокков.

Из грибов в организме человека чаще всего встречаются кандиды – Candida albicans и Candida tropicales. Основным биотопом является кишечник. У здорового человека обнаруживается не более 104 КОЭ/мл. Увеличение концентрации грибов, особенно у иммунокомпрометированных лиц, может сопровождаться развитием микозов.

Кандиды широко распространены в окружающей среде. Жизнеспособные клетки этих микроорганизмов могут обнаруживаться в почве, питьевой воде, продуктах питания, коже, слизистых оболочках человека. То есть, постоянный контакт человека с представителями рода Кандида неизбежен, однако результат этого контакта неодинаков у различных индивидов и определяется состоянием системы колонизационной резистентности в организме.

В последние годы, микозы, обусловленные чрезмерным ростом в биотопах грибов рода Кандида, приобрели статус серьезной клинической проблемы. Все шире распространяются орофарингеальные и вагинальные кандидозы, кандидозы кишечника, ротовой полости, легких. Серьезной проблемой является увеличение случаев висцеральных кандидозов, которые поражают легкие, кишечник, печень, поджелудочную железу и другие органы, что приводит к развитию кандидозного сепсиса, который нередко заканчивается летально.

Также довольно часто в мазке обнаруживаются актиномицеты. Эти грибы широко распространены в природе, потому постоянно попадают в пищеварительный тракт человека. Некоторые в ходе филогенеза и онтогенеза приспособились к существованию в отдельных биотопах. Особенно часто представители актиномицетов выделяются из ротовой полости.

По уровню организации они занимают промежуточное положение между бактериями и грибами. Морфологически они чрезвычайно полиморфные. Клетки представляют собой прямые, слегка изогнутые палочки, рже – нити с ярко выраженным разветвлением. Часто образуют скопления. Во многом сходны с пропионокислыми бактериями. Являются грамположительными, неподвижными, аспорогенными, факультативно или облигатно аэробными, с различной кислоточувствительностью.

Отличаются невысокой требовательностью к составу среды благодаря высоким собственным биосинтетическим возможностям. Ферментативная активность довольно разнообразна. Среди этих микроорганизмов существуют сахаролитические формы, которые ферментируют широкий спектр углеводов, используя различные пути анаэробного метаболизма и их комбинации. Известно, что среди актиномицетов встречаются суперпродуценты антибиотиков, которые довольно успешно используются в промышленной микробиологии.

Несмотря на полезные свойства многих актиномицетов, увеличение их концентрации в биотопах человека необходимо рассматривать как патологические изменения в составе микробиоты, поскольку среди актиномицетов, особенно их облигатно анаэробных групп, есть достаточно много патогенных форм. Опасность патологического увеличения популяций актиномицетов в биотопах человека состоит в высокой жизнеспособности этих организмов, которая не уступает резистентности спороносных патогенов к неблагоприятным изменениям условий окружающей среды.

Полиморфные кокки в мазке

Почти все кокки обладают полиморфизмом – способностью изменять свою форму в процессе адаптации к условиям существования. В основном их форма варьирует в пределах от округлой до сферической. Некоторые из них могут объединяться в комплексы, образуя при этом диплококки, цепочки, нити и даже скопления.

Палочки и кокки в мазке

В мазке могут встречаться кокки, численность которых резко повышается при развитии воспалительного процесса, на фоне снижения иммунитета. Они имеют округлую или овальную форму. В норме являются представителями нормальной микрофлоры, при патологии – вызывают различные инфекционные заболевания.

Повышение количества кокков часто сопровождается повышением и другой условно-патогенной флоры, в частности, палочек. Такое название эти формы микроорганизмов получили благодаря тому, что они имеют вид палочек. Могут быть различных размеров, плотности, окраса. Типичным представителем палочковых форм является кишечная палочка – Escherichia coli. Также сюда относят представителей рода Bacillus. В норме присутствуют в толстом кишечнике, входят в состав нормальной микрофлоры. Являются факультативно-анаэробными формами.

При лечении и диагностики дисбактериозов кишечника первостепенная роль отводится определению количественных и качественных показателей кишечной палочки. В норме она стимулирует иммунитет, нормализует перистальтику и моторику кишечника, нормализует пищеварительные процессы, улучшает всасывание и усвоение питательных веществ, синтезирует гормоны и другие активные компоненты.

Палочки, как правило, подвижны, передвигаются при помощи перитрихиальных жгутиков, по Грамму окрашиваются негативно. Располагаются отдельно или парами. Обладают широким спектром ферментативной активности.

При превышении концентрации выше допустимой, развиваются инфекционные заболевания: болезни наружных, внутренних органов, почек, печени, селезенки. При массивном поражении или попадании инфекции возможны тяжелые инфекционные процессы, которые нередко заканчиваются летальным исходом. Многие представители этой группы способны синтезировать токсины, которые выделяются во внутреннюю среду, а также во внешнее пространство.

Кокки и диплококки в мазке

Кокки в мазке часто объединяются между собой, образуя пары. Такие сдвоенные кокки получили название диплококки, где приставка «дипло» означает два, то есть два кокка. От этого их свойства не меняются. Они по-прежнему остаются представителями нормальной микрофлоры, обеспечивая надежную защиту соответствующего биотопа. При превышении показателей нормы в количественном отношении, развивается инфекционное заболевание.

что это такое, разновидности, классификация и опасность кокковой флоры

Во время осмотра у гинеколога женщинам довольно часто выполняется забор мазка из влагалища для дальнейшего анализа на патогенную флору.

В норме в организме человека обитает огромное количество различных бактерий. При этом, только некоторые из них способы стать причиной развивающегося заболевания.

Одними из наиболее часто выявляемых бактерий, которые обнаруживаются после гинекологического осмотра, являются кокки в мазке. Данные шаровидные микроорганизмы обитают в организме человека и становятся источником патогенной микрофлоры.

В том случае, если общий баланс стерильности в организме поддерживается в стабильности, кокки безвредны. Совершенно иная картина наблюдается при ослабленном иммунитете больного, который страдает от активной жизнедеятельности кокков. Особенно опасными они будут для женщин во время вынашивания ребенка.

Поможет лучше понять особенности кокков в мазке, и что это такое вообще, подробное описание данных бактерий, а также их разновидности.

Виды кокков, и в чем их опасность

Следует понимать, что у женщин могут быть обнаружены разные виды кокков. Довольно часто при этом выявляются стрептококки. Они становятся причиной воспаления в половых органах и дисбактериоза.

Еще одними часто выявляемыми бактериями являются энтерококки. Они свидетельствуют о несоблюдении женщиной необходимой личной гигиены. Данные виды кокков требуют обязательного лечения.

Следующими по частоте диагностирования являются гонококки. Данные бактерии часто становятся причиной острого воспаления.

При поражении инфекцией возможно обнаружение диплококков. Такие палочки провоцируют острое нарушение микрофлоры и могут стать источником затяжного воспаления.

Причины

Кокки в мазке способны повысить свою распространенность в микрофлоре вследствие следующих причин:

  • Резкое снижение иммунной системы, которое может случиться при стрессе, плохом питании, болезни.
  • Практика спринцевания, которое при отсутствии медицинской необходимости нарушает естественный баланс микрофлоры влагалища у женщин. Это довольно частая причина нарушения природной флоры влагалища.
  • Ранняя половая жизнь, при которой у девушки еще не полностью сформирована природная защитная микрофлора влагалища.
  • Несвоевременная замена прокладок, вследствие чего во влагалище развиваются бактерии.
  • Использование некачественного синтетического белья.
  • Несоблюдение нормальной интимной гигиены.
  • Практика половых контактов без использования презерватива. Особенно опасным считается незащищенный секс с разными непроверенными партнерами. Это повышает риск не только нарушения в микрофлоре, но и также вероятность заражения рядом инфекционных половых болезней.
  • Длительное лечение антибактериальными средствами. В таком случае у человека нарушается полезная микрофлора, что дает толчок к развитию кокков.

Помимо этого, выявление кокков у женщин возможно во время гормонального дисбаланса и беременности.

Симптомы

Первым характерным признаком кокков в микрофлоре является резкий запах из половых органов, напоминающий соленую рыбу. Также в подобном состоянии у женщины будут наблюдаться обильные слизистые выделения.

Во время интимной близости женщина может ощущать боль и дискомфорт.

Данные признаки должны стать сигналом к действию, а именно — обращению к гинекологу, ведь своевременное выявление и лечение недуга в разы повышает шанс на скорейшее выздоровление.

Кокковая флора в мазке: тактика лечения отклонения и профилактика его развития

Здоровая микрофлора во влагалище состоит из так называемых полезных лактобактерий и пептострептококков.

Основной задачей нормальной микрофлоры является создание особой кислотной среды, в которой не смогут размножаться патогенные бактерии. Также полезная микрофлора подавляет активность различных грибков, которые могут начать развиваться при снижении защитных сил организма.

О чем говорит наличие кокков

При нарушенной микрофлоре во влагалище наблюдается снижение количества лактобактерий. Это приводит к быстрому распространению болезнетворных микроорганизмов.

При щелочной среде лактобактерии погибают, а вместо них образуется многочисленная кокковая флора в мазке. В дальнейшем это становится причиной эндометрита и бесплодия.

Лечение

Для выявления кокков женщине стоит обратиться к гинекологу, который выполнит забор мазка из влагалища с помощью специального прибора. Процедура может быть немного неприятной, однако боли обычно она не вызывает. В качестве материала для анализа используется слизь или выделения из влагалища.

Следует отметить, что в мазке здоровой женщины могут быть выявлены единичные кокки и это будет совершенно нормально, так как ее микрофлора способна самостоятельно бороться с ними.

В том случае, если изменение во флоре вызвано половой инфекцией, то мазок поможет выявить конкретного возбудителя болезни, будь то гонорея, трихомониаз и т.п.

Лечебная терапия подбирается для каждой пациентки отдельно, исходя из конкретного вида бактерии и первопричины ее активного размножения. Также гинеколог обязательно учитывает наличие у женщины дополнительных заболеваний, беременности, общего состояния здоровья.

Традиционное лечение кокков предусматривает назначение противобактериальных препаратов. Они могут быть в виде таблеток, вагинальных свечей или растворов.

Для укрепления иммунитета используются иммуномодуляторы.

При выявлении инфекционных процессов, вызванных хламидиями, цитомегаловирусом и т.п., назначаются антибиотики.

Профилактика

Уберечь себя от развития кокков в микрофлоре влагалища помогут следующие профилактические рекомендации:

  • Иметь постоянного проверенного полового партнера, а при случайных сексуальных контактах обязательно пользоваться презервативом.
  • Носить качественное удобное нижнее белье из хлопка. Что касается использования синтетических трусиков по типу стринг, то от них лучше отказаться.
  • Дважды в день проводить личную гигиену интимной области с использованием жидкого мыла (с добавлением молочной кислоты).
  • Каждые три часа менять прокладки, как ежедневные, так и для менструаций.
  • Отказаться от курения, приема спиртного и минимизировать стрессы, которые, снижают иммунитет.
  • При лечении антибиотиками следует обязательно принимать пробиотики, которые защитят микрофлору от поражения.
  • Сбалансированно питаться. В рационе должны преобладать свежие овощи и фрукты, а также кисломолочные продукты.

Автор: Оксана Свиридова

Кокки в мазке

Если в мазке на флору обнаружены кокки в большой концентрации, следует немедленно начинать соответствующее диагнозу лечение. Инфекции, вызываемые активным размножением этих организмов, могут привести к развитию серьезных заболеваний и раковых опухолей.

Кокки в мазке – причины:

  1. Длительное использование антибиотиков без назначения врача и приема лекарственных препаратов для защиты микрофлоры.
  2. Недостаточная или неправильная гигиена.
  3. Незащищенные сексуальные контакты.
  4. Беспорядочная половая жизнь.
  5. Частые спринцевания.
  6. Ношение неудобного белья или изделий из синтетических материалов.
  7. Раннее начало половой жизни.
  8. Использование недезинфицированных предметов или грязных рук для мастурбации.
  9. Оральный и анальный секс с больным партнером.

Кокки в мазке – симптомы:

  • увеличение количества слизистых выделений;
  • повышение вязкости и густоты выделений;
  • изменение цвета слизи с прозрачного на белый или желтый;
  • присутствие резкого неприятного запаха;
  • зуд или жжение, постоянное чувство дискомфорта.

Как происходит размножение кокков?

В нормальной микрофлоре присутствуют:

  • небольшое количество пептострептококков;
  • ацидофильные лактобактерии;
  • бифидумбактерии.

При нарушении баланса происходит защелачивание слизистых оболочек и тканей. К лакто- и бифидумбактериям присоединяются грамположительные кокки и в мазке обнаруживается повышенное содержание пептострептококков в клеточной структуре. Постепенно ацидофильные лактобактерии погибают, среда в слизистых становится нейтральной или слабокислой. Это приводит к размножению бактерий и воспалительным процессам различного характера.

Кокки в мазке – норма и отклонения

В норме анализ должен показать большое содержание лактобактерий и палочек Додерлейна – 95%. Кокки и лейкоциты в мазке должны составлять не более 5% или встречаться единично в поле зрения. Также в небольшом количестве обнаруживаются эпителиальные клетки. Реакция среды – кислая, показатель рh не превышает значение 4,5.

Сплошь кокки в мазке свидетельствуют о протекании воспалительного процесса и наличии болезнетворных организмов. При этом обнаруживается повышенное содержание лейкоцитов и большое количество клеток эпителия. Реакция среды может быть трех видов:

  1. Нейтральная, значение ph до 5,0.
  2. Слабокислая, значение ph до 7,0.
  3. Щелочная, значение ph достигает 7,5.

Кокки в мазке из носа и зева

Слизистые оболочки носоглотки также постоянно подвергаются бактериальным инфекциям. При длительном и тяжелом течении воспалительных заболеваний верхних дыхательных путей назначается мазок на флору из зева или носа. Обнаружение кокковых инфекций свидетельствует о необходимости приема антибактериальных препаратов (антибиотиков) и проведения обеззараживающих физиотерапевтических процедур (кварцевание, ингаляции, полоскания).

Полная расшифровка анализа мазка на флору и кокки может быть произведена только лечащим врачом. Показатели нормы хоть и являются общепринятым стандартом, каждый организм сугубо индивидуален и превышение определенного установленного количества кокков не всегда означает наличие инфекции или венерических заболеваний. При установлении диагноза учитывается количество других составляющих микрофлоры, их соотношение и определяются оптимальные значения кислотно-щелочного баланса.

Кокки в мазке у мужчин и причины их появления

Кокки в мазке у мужчин выявляются в лабораторных условиях. Бактерии постоянно проживают в мочевыводящей системе. Под воздействием различных факторов микроорганизмы начинают активно размножаться и замещать собой полезную микрофлору. Кокки относятся к условно-патогенным микроорганизмам. Пагубное влияние эти бактерии оказывают только при наличии сопутствующих факторов.

Какие микробы можно выявить при обследовании

Кокки являются родом различных микробов. К нему относятся следующие микроорганизмы:

  • Стафилококк золотистый;
  • Гонококк;
  • Стрептококки.

Мочевыводящая система мужчины постоянно заселена этими микроорганизмами. Стрептококк и стафилококк необходимы микрофлоре для устранения продуктов распада из канала, поедания омертвевших клеток тканей. Под влиянием различных причин в организме человека происходит массовая гибель полезной флоры. Стрептококк и стафилококк заселяется на освободившийся участок. Так как место не имеет продуктов питания для них, кокки начинают уничтожать живые клетки ткани. Этот процесс вызывает воспаление мочевыводящих путей и некроз отдельных участков канала.

Гонококк появляется в организме при незащищенном половом контакте или через ранки в общественных банях. Бактерия атакует полезную флору и вызывает массовую гибель организмов. Микроб обладает воспалительными свойствами. Особенно опасен он для половых желез. Воспалительный процесс, вызванный гонококком, сопровождается образованием жидкости. В ее состав входят омертвевшие клетки эпидермиса, белые кровяные тельца и гной.

Причины развития инфекции

Существует огромное количество факторов, влияющих на патогенное размножение болезнетворных микроорганизмов. Кокки в мазке у мужчин появляются под воздействием следующих причин:

  • Нарушение иммунитета;
  • Дополнительные заболевания;
  • Лечение антибиотиками;
  • Незащищенный половой контакт;
  • Травмы половых органов;
  • Хирургическое вмешательство.

Нарушение иммунной системы влияет на состояние всего организма. Снижение иммунитета приводит к развитию различных заболеваний в мочеполовой системе мужчины. Воспалительный процесс приводит к уменьшению количества полезных организмов. Их место занимают кокки. Бактерии поражают мочевыводящие пути и половые железы. Особенно часто при сниженных защитных функциях воспалительный процесс поражает предстательную железу. У мужчины развивается бактериальный простатит.

Дополнительные или сопутствующие заболевания снижают активность нормальных клеток и активизируют работу патогенных бактерий. Наличие у пациента таких заболеваний, как: сахарный диабет, пневмония, язва или гастрит, приводит к появлению кокков. Сахарный диабет оказывает некротическое влияние на периферические вены мужчины. При данном заболевании происходит истончение сосудистых стенок. Происходит снижение питания тканей кислородом. Многие бактерии из рода кокков относятся к анаэробным организмам. Эта особенность помогает им поселяться на органах, в которые не поступает кислород. Кокки поселяются на поврежденном участке, происходит развитие инфекции.

Прием пациентом антибиотиков приводит к активному размножению кокков. Лекарственные вещества антибиотического действия оказывают губительное действие на все виды бактерий. Длительное употребление антибиотиков влечет снижение уровня полезной микрофлоры. Кокки начинают активно размножаться и заселяться на освободившиеся участки тканей. При этой причине необходимо учитывать, что бактерия будет иметь резистентность к данному веществу. Подбор препаратов должен осуществлять специалист.

Незащищенный половой контакт является главной причиной заражения венерическими заболеваниями бактериальной этиологии. Хламидиоз, гонорея и другие опасные недуги появляются в организме при беспорядочных сексуальных контактах мужчины. Игнорирование защиты ведет к инфицированию организма опасными патологиями.

Травмы половых органов и хирургическое вмешательство может вызвать изменение уровня флоры, и активизирует процесс развития кокков. При использовании не стерильных или плохо продезинфицированных инструментов в организм попадают болезнетворные организмы, которые влекут развитие недугов мочеполовой системы.

Симптоматика заболеваний

Кокки в мазке у мужчин высеиваются при разнообразных заболеваниях мочеполовой сферы. У мужчины возникают различные симптомы. Кокки сопровождаются появлением следующих признаков:

  • Зуд и дискомфорт в мочеиспускательном канале;
  • Болевые ощущения при опорожнении пузыря;
  • Появление гноистой жидкости;
  • Краснота и отечность органов паховой зоны.

Зуд и дискомфорт появляются при поражении кокками ткани мочевыводящего канала. Омертвевший эпидермис выводится с мочой. На пораженном участке уретры возникает очаг воспаления. При прохождении жидкости по уретре, воспаление усиливается. У мужчины появляется болевое ощущение и дискомфорт.

Гонококки и энтерококки сопровождаются выделением серо-зеленой жидкости из уретры. Вещество обладает неприятным запахом. Если инфекции протекает длительное время, то к гною может примешиваться кровь. Наличие у мужчины выделений, несвойственных для организма, является поводом для незамедлительного посещения врача.

Энтерококки и стафилококки вызывают отек тканей мочеиспускательного канала и мошонки. При ощупывании отек имеет твердые и напряженные стенки, уретра не ощущается. Сильная отечность приводит к усложнению опорожнения мочевого пузыря. Больной часто посещает туалет, опорожнение пузыря полностью становится невозможным. Проблему необходимо устранять путем лечения.

Диагностика заболевания

Кокки в мазке у мужчин можно выявить при лабораторном исследовании. Пациенту необходимо заблаговременно подготовиться к обследованию. Мазок из уретры берется при соблюдении следующих правил:

  1. Отсутствие половой жизни;
  2. Отказ от сопутствующей терапии;
  3. Определенные условия мытья тела.

Больному необходимо отказаться от сексуальной жизни на 5 дней. За этот период в мочеиспускательном канале накопится необходимое количество болезнетворных бацилл. Если это условие не соблюдается, то анализ будет недостоверный.

Многие мужчины принимают препараты от сопутствующих заболеваний. Для достоверности анализа, необходимо уточнить у лечащего врача, можно ли принимать лекарства до сдачи мазка. Если в лечение входит прием антибиотиков, то мужчине необходимо прекратить терапию, так как может снизиться уровень микробов.

Пациенту нужно знать, что антибактериальные гели для мытья тела снижают уровень кокков в уретре. Микроорганизмы уходят в мочевыводящие пути. Необходимо отказаться от мытья такими средствами за сутки до анализа. В противном случае мазок будет недействительным.

Правильно взятый мазок отправляют в лабораторию. Специалисты заселяют микробы в чашу и выращивают колонию. Это необходимо для выявления чувствительности кокков к лекарственным веществам.

Лечение заболеваний

Все патологии, вызванные кокками, необходимо лечить медикаментозно. Специалисты используют две фармакологические группы:

  • Антибиотики;
  • Нпвс.

Первые лекарственные средства подбираются в лабораторных условиях. Необходимо использовать те препараты, которые показали 70% и более эффективности в борьбе с бактериями.

Кокки в мазке у мужчин при воздействии антибиотиками умирают. Если гибель происходит более 5 дней, то врач подключает противомикробные вещества. Они помогут уничтожить остатки жизнедеятельности кокков, и снижают уровень болезнетворных клеток в мочеполовой системе. Терапию антибиотиками проводят не более 7 дней. Если лечение не привело к положительному итогу, то необходимо сменить лекарственное вещество.

Нестероидные противовоспалительные препараты помогут уменьшить воспалительный процесс. Медикаменты необходимо принимать в течение 7–14 дней до полного устранения патогенного процесса. Мужчина, принимающий нпвс, должен обращать внимание на появление различных неприятных симптомов. Эта фармакологическая группа вызывает патологии со стороны желудочно-кишечного тракта и печени.

Любые проблемы с мочеполовой системой возникают под воздействием патогенных микробов. Кокки в мазке у мужчин являются поводом для незамедлительного лечения.

Многоцентровая оценка частоты ошибок окрашивания по Граму

РЕЗЮМЕ

Окрашивание по Граму остается краеугольным камнем диагностических тестов в микробиологической лаборатории для руководства эмпирическим лечением до получения результатов посева. Неправильно интерпретированные окраски по Граму могут отрицательно сказаться на уходе за пациентом, и тем не менее нет никаких всеобъемлющих исследований, которые оценивали бы надежность метода, и нет установленных стандартов эффективности. В этом исследовании лаборатории клинической микробиологии в четырех крупных центрах третичной медицинской помощи оценили частоту ошибок окрашивания по Граму для всех типов образцов, не содержащих кровь, с использованием стандартизованных критериев.Исследование было сосредоточено на нескольких факторах, которые в первую очередь способствуют ошибкам в процессе, включая низкое качество образцов, подготовку и интерпретацию мазков. Количество экземпляров в течение периода оценки варьировалось от 976 до 1864 экземпляров на участок, всего 6 115 экземпляров. Результаты окрашивания по Граму отличались от результатов посева для 5% всех образцов. Пятьдесят восемь процентов противоречивых результатов были образцами, в которых не было обнаружено микроорганизмов при окрашивании по Граму, но наблюдался значительный рост в культуре, в то время как в 42% несоответствующих результатов были обнаружены микроорганизмы при окрашивании по Граму, которые не были восстановлены в культуре.При просмотре доступных слайдов 24% (63/263) несовпадающих результатов были вызваны ошибкой читателя, которая значительно варьировалась в зависимости от сайта (от 9% до 45%). Частота ошибок окрашивания по Граму также варьировала от 0,4% до 2,7%. Эти данные демонстрируют значительную вариативность результатов окрашивания по Граму между лабораториями и подтверждают необходимость постоянной оценки качества в лабораториях. Стандартизованный мониторинг пятен по Граму является важным инструментом контроля качества для лабораторий и необходим для установления эталона качества в лабораториях.

ВВЕДЕНИЕ

Лаборатории клинической микробиологии претерпели кардинальные изменения с внедрением новых технологий, однако традиционные методы, такие как окраска по Граму, по-прежнему играют ключевую роль на протяжении всего диагностического процесса (1–3). Окрашивание по Граму изначально используется как преаналитический индикатор качества образца и его пригодности для посева. Они также предоставляют клиницисту предварительную информацию о природе потенциальных патогенов, присутствующих в образце пациента, и, таким образом, служат для руководства эмпирической терапией.Хотя окрашивание по Граму было основным продуктом лабораторий клинической микробиологии более века, оно по-прежнему считается процедурой высокой сложности в рамках программы улучшения клинических лабораторий (CLIA). Ручной характер процесса окрашивания и субъективность интерпретации окрашивания по Граму способствуют возникновению ошибок (4–7). Неправильный забор образцов, обработка образцов, подготовка мазка и предшествующая антибактериальная терапия — все это факторы, которые могут отрицательно повлиять на результат окрашивания по Граму.Врожденная природа некоторых организмов также может приводить к ошибочным результатам; например, Acinetobacter spp. может окрашивать грамположительные, тогда как Bacillus spp. виды могут оказаться грамотрицательными. Кроме того, методы окрашивания, такие как использование цитоспина и методы фиксации (нагревание по сравнению с метанолом), могут варьироваться от одной лаборатории к другой и даже внутри лабораторий, что потенциально может существенно повлиять на качество результата (8).

Клинические химики приложили согласованные усилия, чтобы охарактеризовать природу и частоту ошибок в химических лабораториях (9, 10).Они также начали генерировать многоцентровые данные о частоте ошибок в преаналитическом, аналитическом и постаналитическом тестировании с долгосрочной целью разработки показателей качества специально для уменьшения ошибок в клинических лабораториях (11, 12). В таких областях, как хирургическая патология, CLIA ’88 требует корреляции результатов для случаев, когда цитологические и хирургические образцы взяты из одного и того же места (13). Такие полномочия побудили патологов попытаться стандартизировать, классифицировать, измерить и определить влияние ошибок в своей области (13–18).Эти исследования выявили проблемы, которые не отличаются от тех, с которыми сталкиваются клинические микробиологи. При сравнении цитологических и гистологических образцов частота ошибок в диагностике рака составила 11,8% (13). Попыткам оценить основные причины этих ошибок препятствовали значительная вариативность между наблюдателями и отсутствие консенсуса (19). Несмотря на эти проблемы, эти усилия привели к вмешательствам, которые снизили частоту ошибок при хирургической патологии (15).

Несоответствующие результаты окрашивания по Граму могут возникать по ряду причин.Положительные окраски по Граму с отрицательными результатами посева могут быть связаны с привередливыми или нежизнеспособными организмами и неспособностью заказать соответствующее тестирование, такое как посев анаэробов. Ложноотрицательные окрашивания по Граму могут возникать из-за неадекватной подготовки образца или мазка или из-за того, что не было исследовано достаточное количество полей. Кроме того, обучение и поддержание навыков окрашивания по Граму остаются сложной задачей (5, 20). В результате объединения лабораторий клинической микробиологии многие общественные больницы остались с ограниченными лабораторными возможностями.Окрашивания по Граму часто читают специалисты широкого профиля с ограниченной подготовкой и знаниями в области микробиологии, что отрицательно сказывается на качестве результатов (5, 7). Отсутствие воспроизводимости результатов окрашивания по Граму, особенно с респираторными образцами, также заставило некоторых усомниться в его полезности (2, 4, 21). Исследования показали, что ошибки возникают и могут иметь серьезные неблагоприятные клинические последствия (3, 6, 22). Колледж американской патологии (CAP) рекомендует лабораториям соотносить результаты окрашивания по Граму с результатами посева, но они не уточняют, как это должно происходить.Несмотря на важность этого метода в процессе принятия клинических решений, отсутствуют исчерпывающие данные о частоте ошибок при выполнении и интерпретации красок по Граму. В более мелких исследованиях изучались только конкретные типы образцов в рамках одного учреждения, но лаборатории, стремящиеся сравнить свою работу с аналогичными учреждениями, будут изо всех сил пытаться найти соответствующие меры. Мы оценили эффективность окрашивания по Граму для подмножества образцов, представленных в рамках рутинного ухода за пациентами в четырех различных клинических микробиологических лабораториях в крупных центрах третичной медицинской помощи, используя стандартизованные критерии, чтобы получить данные, которые потенциально могут быть использованы для установления ориентира для приемлемых стандартов. для оценки эффективности окрашивания по Граму и определения ключевых областей для улучшения.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

В исследование были включены четыре микробиологические лаборатории с полным спектром услуг в специализированных учреждениях и государственных медицинских центрах с различными группами пациентов. Ежегодный объем бактериальных культур участвующих лабораторий составлял от 90 000 до 300 000. В ходе исследования лаборатории-участники проспективно провели скрининг результатов мазка / посева для всех небровокровных образцов, для которых окрашивание по Граму выполнялось как часть обычного посева. Это включало респираторные, жидкостные, биопсийные ткани и образцы из раны.Не включенные образцы представляли собой культуры мочи, которые не получали стандартного окрашивания по Граму, и жидкие культуры, которые были засеяны непосредственно во флаконы для культур крови без планшетов для культивирования, чтобы обеспечить количественное определение роста. Скрининг проводился либо вручную, либо с использованием отчетов автоматизированной лабораторной информационной системы (ЛИС). Хотя исследование проводилось в 2014 году, фактическая продолжительность исследования и время выполнения варьировались между сайтами из-за ограниченности персонала и различного объема тестов между сайтами.

Критерии отбора. Данные обзора ~ 42000 результатов посева в одном из участвующих центров (Р. Каваньоло, личное сообщение) показали 94% корреляцию между результатами посева и окрашиванием по Граму для некровных образцов с положительными культурами, показывающими умеренное / много (3 + / 4 +) колонии в обычных аэробных культурах. Относительно высокая корреляция между окрашиванием по Граму и результатами посева в этой подгруппе делала ее идеальной для скрининга противоречивых результатов. Напротив, данные из того же места показали, что образцы с небольшим количеством (2+) колоний в культуре имели только 76% корреляцию с результатами окрашивания по Граму, в то время как образцы с редкими (1+) колониями в культуре имели 29% корреляцию с результатами окрашивания по Граму.

Результаты считались несоответствующими и помечались для проверки, если образцы имели окраску по Граму, а результаты культивирования соответствовали следующим критериям: (i) культура показала умеренное количество / много колоний определенного организма, но окраска по Граму была отрицательной для организма с соответствующей морфологией / окраской характеристики, или (ii) окраска по Граму показала умеренное количество бактерий / большое количество бактерий, но культура была отрицательной для роста соответствующего организма.

Окрашивание по Граму выполняли согласно лабораторным протоколам в отдельных центрах.Никаких серьезных различий в протоколах окрашивания по Граму между участками отмечено не было, за исключением методов фиксации мазка (нагревание по сравнению с метанолом), с одним участком (C), использующим фиксацию метанолом, в то время как остальные участки использовали тепловую фиксацию. В Центре А использовался автоматический краситель по Граму (Midas 3; EMD Millipore, Дармштадт, Германия). Использование цитоспина для концентрирования образцов жидкости проводилось во всех центрах в соответствии с индивидуальными лабораторными протоколами для стерильных жидкостей. Образцы, результаты которых соответствовали критериям скрининга, были классифицированы как «несоответствующие», а анализ исходного окрашивания по Граму проводился назначенным сотрудником лаборатории (старшим технологом / директором лаборатории), который сначала исследовал предметное стекло при малом увеличении (100 ×) и затем исследовали не менее 40 нефтяных иммерсионных (1000 ×) полей / слайд.Несоответствующие мазки, первоначально зарегистрированные как положительные на бактерии, считались ошибками, если соответствующий организм не наблюдался после анализа мазка или если были отмечены очевидные артефакты. Несоответствующие мазки, первоначально отмеченные как отрицательные, считались ошибками, если присутствие микроорганизма было отмечено в 3 или более полях при просмотре мазка. Рецензенты не коррелировали наличие / отсутствие или количественную оценку лейкоцитов (WBC) или эпителиальных клеток, за исключением определения приемлемости респираторных образцов для культивирования в соответствии с критериями, специфичными для конкретного места.Кроме того, для образцов, которые были положительными по окраске по Граму, но отрицательными по культуре, лаборатории определили, проводились ли посевы анаэробов.

Анализ данных. Было задокументировано количество слайдов, которые не удалось извлечь для просмотра. Частота ошибок рассчитывалась на основе количества слайдов, доступных для просмотра. Прогнозируемая частота ошибок для всех слайдов была рассчитана как процент от общего количества образцов, включенных в исследование, и как количество ошибок на 1000 образцов.Статистический анализ был проведен с использованием Microsoft Excel, чтобы сравнить долю ошибок на сайте к общему количеству для всех сайтов с использованием Z-баллов. Z-оценка для каждого сайта указывает стандартное отклонение от среднего.

РЕЗУЛЬТАТЫ

В ходе исследования результаты от 6 115 образцов (от 976 до 1864 образцов на участок) были проанализированы на предмет противоречивых результатов мазка / посева. Распространенность несоответствующих образцов была относительно стабильной на всех участках (от 4 до 6%), при этом 303/6 115 (5%) результатов считались несоответствующими согласно критериям исследования (Таблица 1).Из-за логистических трудностей получения слайдов для вторичного просмотра в лабораториях с большим объемом исследований было доступно только 263/303 (87%) слайдов. Это говорит о том, что лаборатории должны разработать надежные методы удержания слайдов. Более половины несовпадающих результатов были отрицательными по мазку / положительному посеву (58%), хотя это число варьировалось между участками (от 15% до 85%). В участках A и D было относительно более высокое количество образцов с положительным мазком / отрицательным посевом (от 61% до 85%), чем на участках B и C, в которых была более высокая доля (от 79% до 85%) образцов с отрицательным мазком / посевом. -положительные расхождения (таблица 1).Среди несовпадающих результатов положительный мазок / отрицательный посев, 87/111 (78%) были образцами, которые считались приемлемыми для анаэробного посева. Посев анаэробов не был заказан для 49/87 (56%) этих образцов, при этом пропорция образцов без посева анаэробов варьировалась от 37% до 100% между участками (Таблица 1).

ТАБЛИЦА 1

Частота несовпадения результатов

Несоответствующие результаты мазка / посева в соответствии с критериями исследования составили 5% (303/6 115) от общего числа проанализированных мазков.Среди несоответствующих слайдов было рассмотрено 263/303 (87%), а 62/263 (24%) оказались ошибочными (Таблица 2). В то время как процент общих мазков, которые не соответствовали критериям исследования, был относительно одинаковым в разных учреждениях, фактическая частота ошибок варьировалась от 9% до 45% рассмотренных несовпадающих слайдов. Прогнозируемый процент от общего числа мазков, которые были неправильно прочитаны, составлял 1,2%, хотя этот показатель значительно варьировался от 0,4% до 2,7% между учреждениями (Таблица 2; Z-баллы от 3,6 до -3,1). Средний прогнозируемый уровень ошибок (рассчитанный с учетом непроверенных мазков) на 1000 образцов составил 12.3 (от 3,8 до 26,6) (таблица 2). Частота ошибок по типу образца во всех участках была следующей: жидкости (13%), мазки из раны (33%), респираторные (38%), ткани (8%) и абсцессы (8%).

ТАБЛИЦА 2

Анализ противоречивых результатов и частота ошибок окрашивания по Граму

Большинство неправильно считанных мазков (50/62 [81%]) были ложноотрицательными результатами, когда один или несколько микроорганизмов не были обнаружены при первоначальном обследовании (Таблица 3) . В 8 из 50 ложноотрицательных мазков последующий обзор обнаружил более одного типа морфологии организма, который был пропущен, всего не сообщалось о 60 морфотипах (Таблица 3).Наиболее часто пропущенными морфологиями организмов были грамположительные кокки (28/60 [47%]) и грамотрицательные бациллы / коккобациллы (19/60 [32%]) (Таблица 3). Менее часто пропускаемые микроорганизмы включали дрожжи (13%) и грамположительные палочки (8%). Ложноположительные мазки составили только 19% (12/62) неправильно прочитанных мазков. Большинство из них (9 из 12) были респираторными образцами, которые должны были быть отклонены согласно лабораторным критериям из-за заражения ротовой флорой. Такие результаты были классифицированы как ложноположительные, потому что результат окрашивания по Граму, который должен был быть подавлен в соответствии с лабораторными критериями, указывал на присутствие преобладающего патогена, который не был обнаружен или не зарегистрирован при последующей культуре (Таблица 3).

ТАБЛИЦА 3

Сводка типов ошибок окрашивания по Граму

ОБСУЖДЕНИЕ

Сообщалось, что предотвратимые медицинские ошибки являются причиной смерти 400 000 американцев ежегодно, что является третьей по величине причиной смертности после болезней сердца и рака (23). Если от 60 до 70% медицинских решений основаны на лабораторных результатах, очевидно, что ошибочные лабораторные результаты играют некоторую роль в предотвратимой смертности пациентов (24). Патологоанатомы приложили значительные усилия для отслеживания, классификации и определения последствий ошибок при просмотре слайдов в многоцентровых исследованиях, но у них возникли трудности в достижении консенсуса в отношении интерпретации результатов и основных причин (15, 18, 19).Клинические микробиологи сталкиваются с аналогичными препятствиями при попытках охарактеризовать частоту и характер ошибок в своих лабораториях. Многие из выполненных тестов, такие как окрашивание по Граму, подвержены вариабельности и различиям в интерпретации между технологами. Исследования, в которых изучалась частота ошибок при окрашивании по Граму, как правило, были сосредоточены на практике в одном учреждении и / или на ограниченных типах образцов (2–6, 21, 25, 26). Отсутствие многоцентровых эталонных данных по частоте ошибок в лабораториях клинической микробиологии ограничивает возможность эффективного измерения их эффективности по сравнению с аналогичными.Поскольку ошибки в лабораториях клинической микробиологии могут иметь значительные клинические последствия (22), необходимо приложить больше усилий для сбора данных о частоте их появления в лабораториях клинической микробиологии. Это исследование представляет собой первую подобную попытку получить многоцентровые данные о частоте ошибок при окрашивании по Граму.

Частота противоречивых результатов для образцов была относительно одинаковой между четырьмя центрами (от 4 до 6%), но частота ошибок значительно варьировалась (0.От 4% до 2,7%) (Таблица 2; Z-балл от 3,6 до -3,1). Для участков B и C большинство несовпадающих результатов (79% и 85% соответственно) были отрицательными по окрашиванию по Граму / положительными по культуре, в то время как для сайтов A и D несовпадающие результаты были в основном положительными по окрашиванию по Граму / отрицательными по культуре (85% и 61%). % соответственно) (таблица 1). Хотя на всех участках были внедрены процессы контроля качества для мониторинга корреляций между окрашиванием по Граму и культурой, масштабы программ варьировались в зависимости от местоположения. Сайт A имел строгую автоматизированную систему ежедневного управления для мониторинга противоречивых результатов окрашивания / посева по Граму и имел самый низкий уровень ошибок (0.4%). В участке А также была самая низкая доля образцов с отрицательным мазком / положительным посевом (15%), но, наоборот, в этом участке была самая высокая доля (85%) образцов с положительным мазком / отрицательным посевом. В Центре C проводился ежедневный ручной вторичный анализ всех отчетов о посевах и рутинный повторный анализ мазков из стерильных жидкостей, которые показали присутствие нейтрофилов, но без каких-либо микроорганизмов, отмеченных при первоначальном рассмотрении, и эта лаборатория имела второй самый низкий уровень ошибок (0,9%). . Сайт B полагался на ручное обнаружение несоответствующих результатов мазка / посева техническим персоналом, но ежедневно собирал исправленные отчеты с помощью автоматического отчета из LIS, с немедленным просмотром с привлеченным персоналом.В Центре D использовались ручные процедуры во время рутинного рабочего процесса для обнаружения и отслеживания противоречивых результатов окрашивания по Граму / посева. Отсутствие согласованности в характере расхождений между сайтами указывает на то, что задействовано множество факторов, и решение проблемы согласованности окраски по Граму будет сложной задачей.

Большинство противоречивых результатов (58%) были отрицательными по Граму / положительными результатами посева. Как обсуждалось ранее, стандартизованное определение первопричин в аналогичных исследованиях в нескольких местах было проблематичным (19).Хотя это исследование не отслеживало основные причины противоречивых результатов, участвующие лаборатории сделали ряд наблюдений в ходе исследования. Противоречивые результаты, касающиеся отрицательного мазка / положительного результата посева, при вторичном рассмотрении часто содержали очень мало клеточного материала. Это свидетельствовало о том, что на предметном стекле было недостаточно материала, возможно, из-за использования неоптимальных образцов, таких как мазки для посева / подготовки мазка, а не фактических образцов ткани / жидкости. В качестве альтернативы, отсутствие материала на предметном стекле может также отражать неспособность выполнить адекватную фиксацию перед окрашиванием.Mangels et al. отметили, что использование фиксации метанолом имеет значительные преимущества по сравнению с фиксацией тепла, включая уменьшение искажения клеточной морфологии, уменьшение фонового мусора и повышение вероятности обнаружения микроорганизмов в мазке (8). Однако в нашем исследовании частота ошибок окрашивания по Граму в лаборатории, по-видимому, не коррелировала конкретно с используемым методом фиксации мазка. В сайте C, где для подготовки мазка использовалась фиксация метанолом, коэффициент ошибок составлял 0,9%, в то время как в остальных сайтах, в которых использовалась фиксация тепла, коэффициент ошибок был равен 0.От 4% до 2,7%. Это могло просто указывать на то, что метод фиксации мазка не был единственным фактором, способствовавшим возникновению ошибок. Другие проблемы, отмеченные на всех сайтах, включали неправильное использование цитоспина для концентрации образцов. Было показано, что использование цитоспина для подготовки мазков улучшает чувствительность красителей по Граму (27, 28). Однако концентрация стерильных жидкостей с высоким содержанием клеток может привести к получению слишком толстых мазков, что может увеличить риск получения ложноотрицательных результатов из-за сложности обнаружения микроорганизма среди клеточного материала / мусора.Было также отмечено, что несоответствующее использование eSwabs (Copan Diagnostics Inc., Murrieta, CA) вопреки инструкциям производителя способствует получению противоречивых результатов. Другие факторы, способствовавшие этим расхождениям, включали отказ от заказа анаэробного посева, что имело место для 49/87 (56%) подходящих образцов на всех участках. Это наводит на мысль, что может потребоваться обучение врача для обеспечения назначения соответствующих лабораторных анализов. Лаборатории могут пожелать рассмотреть возможность включения комментариев относительно присутствия анаэробных бактерий в образцах с положительным окрашиванием по Граму, но с отрицательными культурами, когда анаэробные культуры не запрашивались.Для 38/87 (44%) расхождений с положительными результатами по окрашиванию по Граму / отрицательными результатами по культуре, которые не давали роста какого-либо организма на анаэробной культуре, возможно, что при подтверждении вторичным обзором эти результаты представляли присутствие нежизнеспособных или привередливые организмы (таблица 1). Также возможно, что эти результаты указывают на проблемы со сбором, транспортировкой или культивированием образцов анаэробов, которые приводят к потере жизнеспособности организма.

Вторичный анализ несовпадающих мазков показал, что 24% несовпадающих результатов на всех участках были вызваны ошибками в технологической интерпретации пятен по Граму (Таблица 2).Процент общих мазков, которые не соответствовали результатам посева, был относительно одинаковым для разных участков (от 4% до 6%), но доля несовпадающих результатов, которые были ошибками, колебалась от 9% до 45% (Таблица 2). Фактическая частота ошибок на 1000 мазков значительно различалась между учреждениями, при этом по крайней мере 2/4 участков имели Z-баллы> 3 стандартных отклонений от среднего (таблица 2). Относительно высокая частота ошибок среди несовпадающих результатов предполагает, что эта подгруппа мазков может служить идеальной целью для усилий по мониторингу обеспечения качества.Большинство ошибочных результатов мазка были ложноотрицательными (50/62 [81%]), с 8/50 с участием нескольких организмов, всего 60 морфотипов, о которых не сообщалось (Таблица 3). В основном это были грамположительные кокки (47%) или грамотрицательные бациллы / коккобациллы (32%) (таблица 3). Участники на каждом участке отметили, что факторы, способствующие ложноотрицательным мазкам, включают неспособность исследовать достаточное количество полей, визуально разграничить область мазка на слайде и отличить настоящие организмы от остатков пятна или фона.В частности, неспособность отличить микроорганизмы от остатков красителя наиболее заметно была отмечена для грамположительных кокков, которые составляли почти половину (28/60) всех микроорганизмов, пропущенных при ложноотрицательных мазках (Таблица 3). Большинство (9 из 12) ложноположительных мазков было связано с невозможностью отбраковать респираторные образцы, загрязненные ротовой флорой (Таблица 3). Сообщалось, что в этих мазках преобладали грамотрицательные бациллы, в то время как рост культур показал смешанную флору без преобладающего организма (данные не показаны).Только 3/12 ложноположительных результатов были мазками, в которых сообщалось о присутствии бактерий, но при вторичном обзоре бактерии не были обнаружены, что указывает на то, что это не было основным источником ошибок окрашивания по Граму. Данные показали, что большинство ошибок происходит в подмножестве несовпадающих результатов с отрицательным мазком / положительным посевом, при этом 50/153 (33%) расхождений оказались ошибками по сравнению с 12/111 (11%) ошибками в мазке. -положительная / культурально-отрицательная подмножество.

Хотя данные не указали на конкретные факторы как причину ошибок окрашивания по Граму, на основании наблюдений, сделанных в ходе этого исследования, участвующие лаборатории находятся в процессе внедрения улучшений процесса для решения потенциальных проблемных областей.Сюда входит обучение сотрудников лаборатории ключевым аспектам подготовки мазка, включая следующее: разграничение мазка на предметном стекле, использование фиксации метанолом и надлежащее использование цитоспина. Слишком толстые мазки можно предотвратить, отказавшись от использования цитоспина для жидкостей с высоким содержанием клеток. Мазки не должны быть настолько толстыми, чтобы газетная бумага не просматривалась сквозь слайд. Персонал был предупрежден о необходимости повторения мазков с недостаточным материалом и исследования достаточного количества полей.В центре C двойной анализ мазков обычно выполнялся только для части образцов, которые соответствовали определенным критериям. Хотя такой подход может помочь снизить количество ошибок, в некоторых лабораториях может возникнуть проблема с логистикой. Нет доступных данных о влиянии двойного обзора мазков на клиническую микробиологию, но аналогичные подходы в хирургической патологии и цитологии имели переменный успех (15, 29). Meier et al. отметили, что двойной просмотр слайдов из случаев молочной железы и простаты значительно снизил частоту неверных интерпретаций (15).Однако Рааб и его коллеги обнаружили, что просмотр двух слайдов не снижает частоту ошибок, обнаруживаемых во время цитолого-гистологической корреляции (29). Дополнительные шаги включают обучение врачей и обратную связь о необходимости заказа анаэробного тестирования, когда это необходимо, или системный подход рефлексивного упорядочивания анаэробной культуры для конкретных типов образцов. Избегание использования неподходящих образцов, таких как мазки для посева, может снизить вероятность получения противоречивых результатов. Патологоанатомы, а также данные одного из исследовательских центров показали, что отслеживание и категоризация лабораторных ошибок по типу ошибки и индивидууму может выявить закономерности, которые при обращении в режиме реального времени могут снизить частоту ошибок (15, 18, 30). ).Для определения воздействия этих мер необходимы дальнейшие исследования.

Это исследование имеет ряд ограничений. Скрининг на наличие противоречивых результатов ограничивался образцами некрови, которые соответствовали определенным критериям, то есть либо много / умеренно микроорганизмов при окрашивании по Граму, либо много / умеренных организмов в культуре. Частота ошибок, полученная с использованием этого подхода, применима только к этой подгруппе образцов, а истинная частота ошибок для окрашивания по Граму в лабораториях клинической микробиологии может отличаться от цифр, полученных здесь.Мазки не оценивались на предмет точности регистрации присутствия и количественного определения лейкоцитов или эпителиальных клеток. Положительные мазки посевов крови были исключены из-за низкого уровня ошибок окрашивания по Граму для этого типа образцов (6, 26). Только в центре А использовалось автоматическое окрашивание по Граму, поэтому трудно сделать вывод, могло ли это повлиять на качество окрашивания по Граму. На участках использовались разные подходы для сбора несовпадающих результатов: на участке А использовалась автоматизированная программа для сбора несовпадающих результатов мазка / посева, а на участках B, C и D использовалась ручная проверка результатов мазка / посева на предмет расхождений.Возможно, ручной характер практики сбора данных мог повлиять на результаты исследования. Определение того, действительно ли противоречивый результат был ошибкой, основывалось на вторичной проверке старшим технологом / директором лаборатории. Последовательная интерпретация результатов окрашивания по Граму может быть сложной задачей в рамках одной лаборатории и тем более в нескольких учреждениях и потенциально может привести к смещению данных исследования.

Представленные здесь данные являются первым шагом к установлению эталона частоты ошибок при выполнении окрашивания по Граму.Средняя частота ошибок для всех сайтов составила 1,2%; однако были отмечены значительные различия в частоте ошибок между сайтами (Z-оценка в диапазоне от 3,6 до -3,1). Результаты показывают, что могут потребоваться дополнительные данные для установления приемлемых диапазонов эффективности окрашивания по Граму. Хотя это открытие не удивительно, учитывая одновременно технический и субъективный характер окрашивания по Граму, оно подчеркивает необходимость решения различных проблем, влияющих на частоту ошибок при окрашивании по Граму, и стандартизации результатов лабораторных исследований.По мере того, как здравоохранение движется к большей прозрачности и сосредоточению внимания на снижении потенциального вреда из-за медицинских ошибок, лаборатории не могут начать улучшаться, если мы сначала не узнаем, где мы находимся. Мониторинг ошибок при окрашивании по Граму является важным первым шагом в этом процессе.

БЛАГОДАРНОСТИ

Мы благодарим Ричарда Зарбо за его вклад в определение показателей качества в анатомической патологии.

Это исследование не получало специального гранта от какого-либо финансирующего агентства в государственном, коммерческом или некоммерческом секторах.

  • Copyright © 2016, Американское общество микробиологии. Все права защищены.

Окраска по грамму — Лабораторные тесты онлайн AU

Как его использовать?

Окраска по Граму и материала из инфицированного места — это наиболее часто выполняемые микробиологические тесты, используемые для определения причины инфекции. Часто выявления наличия и определения того, вызвана ли инфекция грамположительным или грамотрицательным организмом, будет достаточно, чтобы позволить врачу назначить лечение подходящим эмпирическим антибиотиком в ожидании более конкретных тестов, таких как посев на культуру и антибиотик. чувствительности, будет дополнено.Отсутствие или присутствие лейкоцитов в окраске по Граму может помочь установить, что был получен адекватный образец, поскольку лейкоциты часто присутствуют при инфекции.

За исключением вагинальных образцов, отсутствие или присутствие клеток кожи (эпителиальных клеток) может указывать на загрязненный образец или образец некачественного качества. Тщательная интерпретация клеток и / или бактерий, показанных при окраске по Граму, позволяет практикующим врачам различать нормальную флору и настоящую инфекцию.

Окрашивание по Граму обычно выполняется как часть оценки культуры. Когда в лаборатории размножаются бактерии, проводится окраска по Граму, чтобы помочь определить тип присутствующих бактерий и определить, какие другие тесты могут потребоваться для выявления возбудителя.

Когда это требуется?

Окрашивание по Граму может быть выполнено при подозрении на бактериальную инфекцию. Он проводится на том же образце, что и посев, и результаты теста сообщаются незамедлительно, чтобы помочь в выборе лечения.

Что означает результат теста?

Отрицательное окрашивание по Граму часто определяется как «отсутствие бактерий». Это может означать, что инфекции нет или что в образце недостаточно, чтобы увидеть пятно под микроскопом. Из-за того, что чувствительность теста составляет около 1000 бактерий в мазке, отрицательное окрашивание по Граму не обязательно исключает наличие инфекции.

Положительные результаты окрашивания по Граму обычно включают описание того, что было видно на слайде.Обычно это включает в себя грамположительные (пурпурные) или грамотрицательные (розовые) бактерии, а также их форму — круглую (кокки) или палочковидные (бациллы). Иногда также указывается размер, относительное количество и группировка бактерий, если это необходимо. Если в других клетках (внутриклеточных) присутствуют бактерии, это также будет отмечено; например, наличие красных кровяных телец или лейкоцитов. Эта информация, а также другие клинические данные помогут врачу решить, какое лечение может быть наиболее эффективным, часто до получения результатов.

Однако результаты окрашивания по Граму обычно считаются предварительными, и для подтверждения диагноза необходимы результаты посева и / или других тестов, таких как биохимические, масс-спектрометрические и тесты на определенные типы бактерий. Обычно необходимо провести тестирование на чувствительность к антибиотикам, чтобы определить, какой противомикробный препарат будет наиболее эффективным при лечении инфекции.

Некоторые участки тела, такие как кровь, обычно стерильны, что означает, что бактерии не должны присутствовать на этих участках, если нет бактериальной инфекции.Первоначально они могут присутствовать в небольшом количестве с инфекцией, и образец может потребовать дополнительной обработки, чтобы сконцентрировать бактерии, чтобы их можно было обнаружить с помощью окрашивания по Граму. Другие жидкости и участки тела, такие как кожа или кожа, обычно имеют клетки и присутствуют в дополнение к любым бактериям, вызывающим инфекцию. Окрашивание по Граму на этих типах образцов требует тщательного исследования опытным лаборантом для определения конкретных признаков, указывающих на инфекцию.

Что еще мне следует знать?

Если не лечить, бактериальные инфекции могут распространяться и в конечном итоге вызывать повреждение тканей и органов.Своевременное лечение может ограничить их распространение и серьезность.

Если (в форме дрожжей или плесневых грибов) присутствуют на окраске по Граму, о них сообщают, и при необходимости проводят дальнейшее тестирование для идентификации микроорганизма. Дрожжи могут проявляться в виде отдельных клеток, у которых могут быть бутоны, а плесень — в виде множества ветвей, похожих на растения, называемых гифами.

Паразиты и вирусы не различаются окраской по Граму. Для идентификации этих организмов можно использовать другие микроскопические и / или молекулярные и / или серологические тесты.

Некоторые бактерии не могут быть идентифицированы должным образом с помощью окрашивания по Граму. Например, если врач подозревает, что у человека микобактериальная инфекция, такая как туберкулез, может быть заказан посев AFB (кислотоустойчивых бацилл) на образец мокроты вместо или в дополнение к окрашиванию по Граму и посеву.

Окрашивание по

грамм для лечения перитонзиллярного абсцесса

Цель. Проверить, может ли окрашивание по Граму повлиять на выбор антибиотика для лечения перитонзиллярного абсцесса.Методы. В период с 2005 по 2009 год было проанализировано 57 случаев перитонзиллярного абсцесса на предмет культивирования бактерий и окрашивания по Граму. Полученные результаты. В 16% случаев культивировали только аэробы, в 51% — только анаэробы. Смешанный рост аэробов и анаэробов наблюдался в 21% случаев. Культивированные бактерии были в основном аэробными стрептококками, анаэробными грамположительными кокками и анаэробными грамотрицательными палочками. Фагоцитоз бактерий при окрашивании по Граму наблюдался в 9 случаях.Бактерии, культивируемые в этих случаях, представляли собой аэробные стрептококки, анаэробные грамположительные кокки и анаэробные грамотрицательные палочки. Чувствительность окрашивания по Граму для грамположительных кокков и грамотрицательных палочек составляла 90% и 64% соответственно. Специфичность окрашивания по Граму для грамположительных кокков и грамотрицательных палочек составила 62% и 76% соответственно. Большинство грамположительных кокков были чувствительны к пенициллину, но некоторые анаэробные грамотрицательные палочки были устойчивы к пенициллину. Заключение.Когда окрашивание по Граму показывает только грамположительные кокки, предпочтительным методом лечения является пенициллин. В остальных случаях следует использовать антибиотики, эффективные для устойчивых к пенициллину организмов.

1. Введение

Перитонзиллярный абсцесс — это локализованное скопление гноя в перитонзиллярных тканях, которое обычно возникает в результате острого тонзиллита и последующего перитонзиллярного целлюлита. Это заболевание — одно из наиболее часто встречающихся состояний при неотложных состояниях уха, носа и горла (ЛОР).Он характеризуется болью в горле, тризмом, приглушенным голосом, обезвоживанием, дисфагией и сильной болью. Поэтому некоторым пациентам с перитонзиллярным абсцессом требуется госпитализация. В некоторых случаях может потребоваться интенсивная терапия, поскольку она может привести к фатальным осложнениям, таким как глубокий абсцесс шеи и нисходящий некротический медиастинит [1].

Лечение перитонзиллярного абсцесса состоит из 2 этапов: один — это удаление гноя, а второй — антибактериальная терапия. Для эффективной антибактериальной терапии мы обычно отправляем аспират перитонзиллярного абсцесса на окрашивание по Граму и посев.Однако предыдущие сообщения отрицали эффективность бактериологических исследований [2–4].

Целью этого исследования было изучить эффективность бактериологических исследований перитонзиллярного абсцесса с акцентом на характеристики окрашивания по Граму бактерий и определить ценность этого метода в клинической практике.

2. Материалы и методы

Было проведено ретроспективное исследование случаев перитонзиллярного абсцесса, пролеченных в Центральной больнице Кинки в период с января 2005 года по декабрь 2009 года.За это время пролечен 71 пациент. 62 из этих пациентов прошли пункционную аспирацию и 57 аспиратов были отправлены на микробиологическое исследование. Для аспирации в точке максимальной флюктуации использовалась игла 18 калибра. В период с 2005 по 2007 год шприцы использовались для пункции и аспирации и сразу же отправлялись в отделение микробиологии. С 2008 года аспираты закачивались в анаэробный контейнер для транспортировки и хранения. Затем аспираты обрабатывали для окрашивания по Граму, аэробной культуры и анаэробной культуры.Результаты культуральных исследований были получены для всех 57 случаев, а результаты окрашивания по Граму — для 45 случаев. Низкопатогенная флора полости рта выявлялась и сообщалась только тогда, когда в аспиратах преобладали бактерии.

Определение фагоцитоза при окрашивании по Граму следующее: (1) бактерии, видимые при окрашивании по Граму, считаются теми же бактериями, что и культивируемые бактерии, (2) в фагоцитах содержится более нескольких бактерий и (3) ) количество бактерий в фагоцитах больше, чем вокруг фагоцитов.

Чувствительность культивируемых бактерий к ампициллину определяли дисковым методом Института клинических и лабораторных стандартов.

Статистический анализ выполняли с использованием программного обеспечения JMP (SAS Institute Japan, Tokyo).

3. Результаты

Результаты 57 исследований культур представлены на Рисунке 1. В течение всего периода в 12% случаев не культивировалось ни одной бактерии, только аэробов в 16%, только анаэробов в 51% и обоих аэробов. и анаэробы в 21%. А именно, анаэробы культивировались в 72% случаев.Затем мы изучили влияние способа транспортировки и хранения. Результаты посева между 2005 и 2007 годами, в течение которых шприцы использовались в качестве контейнера, и между 2008 и 2009 годами, в течение которых анаэробный контейнер использовался в качестве контейнера, также показаны на Рисунке 1. Процент случаев культивирования анаэробов в ранний период был сопоставим с более поздними периодами (73% и 69% соответственно), и статистически значимой разницы не было. Это означает, что использование анаэробного контейнера мало влияет на результат культуральных исследований.

Кроме того, в 50 случаях было выявлено 83 патогена (Таблица 1). Из выделенных аэробов 76% (19 из 25 аэробов) были грамположительными кокками (GPC). Самым распространенным аэробом был Streptococcus pyogenes. Он был изолирован в 20% случаев. В отличие от аэробов, среди которых преобладали GPC, GPC и грамотрицательные палочки (GNR) часто наблюдались среди анаэробных патогенов. Наиболее частым грамположительным анаэробом был анаэробный стрептококк (30% случаев). Обычными анаэробными грамотрицательными палочками были Fusobacterium (26%), Prevotella (22%), Bacteroides (8%) и Porphyromonas (8%).Примечательно, что частота встречаемости Staphylococcus aureus, Streptococcus pneumoniae и Haemophilus influenzae была аналогична таковой для низкопатогенной флоры полости рта (то есть Neisseria, Lactobacillus и Bifidobacterium).

9015ero

9013 901

901 901

9015 9015 9015 9015 9015

90 140 1

9015 cocram отрицательный

9015 cocram отрицательный

9013 9015 9013 9015 9015

6 9015 9015 907

6 4

Кол-во изолятов% случаев Кол-во изолятов% случаев
9015bes0


грамположительные кокки грамположительные кокки
Staphylococcus aureus 2 2 26

Streptococcus pneumoniae 1 2 Peptococcus 1 2
Streptococcus pyogenes 10 20
β-Стрептококк 2

грамположительные стержни грамположительные стержни
Corynebacterium sp. 1 2 Bifidobacterium 1 2
Lactobacillus 1 2
Neisseria 2 4 Veillonella 1 2

Грам-отрицательные стержни

9015 9015 9015 2 4 Bacteroides * 7 12
Haemophilus parainfluenzae 1 2 Fusobacterium1

22
Porphyromonas 4 8
Capnocytophaga 1 2



* В одном случае культивировали два штамма.

Чтобы идентифицировать патоген, вызывающий перитонзиллярный абсцесс, мы исследовали фагоцитоз бактерий с помощью окрашивания по Граму. Фагоцитоз бактерий наблюдается, если бактерия является патогеном [5]. Фагоцитоз наблюдался в 9 случаях из 45, в которых проводилось как окрашивание по Граму, так и культуральное исследование. Аспираты были получены до введения антибиотиков в 3 из 9 случаев, а аспираты были получены после начала антибактериальной терапии в остальных случаях.Культивированные организмы из случаев с положительным результатом фагоцитоза показаны в таблице 2. Были обнаружены только аэробные стрептококки, анаэробный GPC и анаэробный GNR. Исходя из результатов таблиц 1 и 2, мы предполагаем, что аэробные и анаэробные стрептококки и GNR (Prevotella, Fusobacterium, Bacteroides и Porphyromonas) являются основными возбудителями перитонзиллярных абсцессов.

9013 901

11

1

1

1

1

1

1

9013 9016 9016 Для выявления патогенов мы сравнили результат окрашивания по Граму с результатами культивирования изолятов.Среди 45 случаев, в которых были получены результаты как исследования культуры, так и окрашивания по Граму, GPC, GPR, GNC и GNR были культивированы в 21 случае, 3 случаях, 1 случае и 28 случаях, соответственно. Мы использовали результат бактериальной культуры в качестве эталона и рассчитали чувствительность, специфичность, положительную прогностическую ценность и отрицательную прогностическую ценность окрашивания по Граму (таблица 3). В таблице 3 важны результаты GPC и GNR как возбудителей болезней. Чувствительность и специфичность окрашивания по Граму для обнаружения GPC составляли 90% (19/21) и 62% (15/24) соответственно; кроме того, его чувствительность и специфичность для обнаружения GNR составляли 64% (18/28) и 76% (13/17) соответственно.Эти результаты говорят о том, что окрашивание по Граму является достаточно надежным методом. Кроме того, положительная прогностическая ценность окрашивания по Граму для GNR достигает 82%, демонстрируя, что антибиотикотерапия против GNR необходима, когда GNR обнаруживается при окрашивании по Граму.


Кол-во случаев

Аэробные грамположительные кокки
Стрептококки
Стрептококк 1

Анаэробные грамположительные кокки
Анаэробный стрептококк 4
Пептококк
Пептококк
7

Prevotella 2
Fusobacterium 1
Bacteroides 1
Porphyromonas 1

грамположительные кокки грамположительные стержни грамотрицательные кокки грамотрицательные стержни

5 90

100 0 64
Специфичность (%) 62 69 100 76
Положительное прогнозируемое значение (%) 68

82
Отрицательная прогностическая ценность (%) 88 100 98 57

Далее, мы проверили, может ли пенис лечить абсцесс.Чувствительность основных патогенов к ампициллину показана в таблице 4. Большинство аэробных и анаэробных GPC были чувствительны к пенициллину. Напротив, анаэробные ЗНР были умеренно устойчивы к пенициллину. Этот результат демонстрирует, что пенициллин эффективен только при отсутствии GNR.

(3/4)


% штаммов, чувствительных к ампициллину

грамположительные кокки

Анаэробные грамположительные кокки
Анаэробные стрептококки 92.3 (12/13)
Peptococcus 100 (1/1)

Анаэробные грамотрицательные стержни 5/7)
Fusobacterium 83,3 (10/12)
Prevotella 100 (11/11)
Porphyromonas

4.Обсуждение

Предыдущие культуральные исследования аспиратов перитонзиллярных абсцессов выявили широкий спектр патогенов, включая как аэробы, так и анаэробы. Анаэробы были изолированы из 72% исследованных аспиратов в этом исследовании. Однако доля анаэробов широко варьирует в разных исследованиях (33–83%) [3, 6–9]. Одной из причин различий является различие в используемых микробиологических методах обработки и культивировании. Анаэробные бактерии легко погибают при кратковременном контакте с воздухом во время отбора проб, транспортировки или обработки.Поэтому аспираты следует транспортировать в анаэробных условиях и сразу же наносить штрихами на чашки для культивирования. Однако немедленная обработка данных иногда затруднена, особенно в нерабочее время лаборатории. Мы начали закачивать аспираты в анаэробные контейнеры для транспортировки и хранения с 2008 года. До 2008 года мы использовали шприцы для пункции и аспирации в качестве контейнеров. Таким образом, мы могли пропустить определенную долю анаэробов до 2008 г., хотя способ хранения и обработки не оказал заметного влияния (рис. 1).Другая причина различий между бактериологическими исследованиями заключается в том, что методы работы с бактериальной флорой полости рта различаются в разных лабораториях. Аспираты обычно содержат патогены, а также флору полости рта. Некоторые лаборатории не изолируют и не сообщают о бактериальной флоре полости рта, предполагая, что эти бактерии не являются возбудителями перитонзиллярного абсцесса. Другие лаборатории изолируют, идентифицируют и сообщают о бактериальной флоре полости рта, предполагая, что эти бактерии являются возможными патогенами. Однако у нас не было точного представления о том, какие бактерии следует культивировать, изолировать и идентифицировать, потому что не только высокопатогенные бактерии, такие как Streptococcus pyogenes, но и бактерии флоры полости рта могут вызывать перитонзиллярный абсцесс.Мы не знали, может ли H. influenzae быть возбудителем перитонзиллярного абсцесса.

Фагоцитоз — основной механизм, используемый для удаления патогенов. Фагоциты уничтожают патогены, поглощая их. Фагоцитированные бактерии могут быть идентифицированы как внутриклеточные бактерии внутри фагоцитов при окрашивании по Граму. Когда образцы для бактериальных исследований были получены из места колонизации потенциальных патогенов, посевы или микроскопическое исследование имеют ограниченную ценность, поскольку обнаруживаются как патогены, так и колонизированные бактерии.В таких обстоятельствах окрашивание по Граму может иметь диагностическое значение, поскольку фагоцитированные бактерии при окрашивании по Граму считаются патогенами [5]. Изучая фагоцитоз при окрашивании по Граму и сравнивая с результатами культивирования, мы выяснили, что S.pyogenes, другие стрептококки и анаэробные GNR (Prevotella, Bacteroides, Fusobacterium и Porphyromonas) являются возбудителями перитонзиллярных абсцессов. Проблема здесь в том, что процент положительных случаев фагоцитоза составляет всего 20% (9 случаев из 45).Одна из причин может заключаться в том, что критерии определения фагоцитированных бактерий в этом исследовании были слишком строгими. Не существует единого определения фагоцитоза при окрашивании по Граму, и в большинстве сообщений для его определения используется качественное описание [10–12]. Другая причина заключается в том, что значительная часть пациентов (21 из 57) получала антибактериальную терапию до пункционной аспирации. Лечение антибиотиками существенно влияет на результат окрашивания по Граму [13].

Хотя более половины врачей-отоларингологов рекомендуют микробиологическое исследование аспиратов перитонзиллярных абсцессов, большое количество из них не проходят регулярное наблюдение [2].Cherukuri и Benninger указали, что бактериологические исследования не нужны при первичном обращении при рутинном лечении перитонзиллярного абсцесса [4]. Репанос и др. сообщили, что курс лечения не был изменен ни для одного пациента в их исследовании на основании результатов микробиологических исследований [3]. Основная причина заключается в том, что рост анаэробов настолько медленный, что отчеты о культуре обычно недоступны во время периода госпитализации. Поэтому мы решили изучить их характеристики окрашивания по Граму.Хотя окрашивание по Граму делит бактерии только на 4 группы, это простая процедура и не требует много времени. Результат можно получить в течение часа. Кроме того, окрашивание по Граму надежно предсказывает типы бактерий (таблица 3).

Пенициллины были антибиотиками первого выбора при лечении перитонзиллярных абсцессов [9, 14, 15]. Snow et al. показали, что пенициллин эффективен в большинстве случаев и что его следует использовать в качестве исходного антибактериального средства у неаллергических пациентов [14].Офир и др. предположили, что удаление гноя, содержащего высокие уровни бета-лактамазы, позволяет введенному впоследствии пенициллину уничтожить восприимчивые бактерии, что объясняет удивительно высокий процент успеха использования пенициллина в их исследовании в 1998 году [16]. Однако сегодня ситуация иная. Увеличение количества организмов, продуцирующих бета-лактамазы, ограничило использование пенициллина. Ввиду смешанной флоры, вызывающей перитонзиллярный абсцесс, и увеличения количества микроорганизмов, продуцирующих бета-лактамазы, использование антибиотиков, активных в отношении бета-лактамаз, стало более популярным в клинической практике [17].По этим причинам антибиотики, рекомендуемые сегодня, — это клиндамицин, усиленный пенициллин и либо пенициллин, либо цефалоспорин плюс метронидазол [18, 19]. Однако, если мы отделим чувствительные к пенициллину организмы от устойчивых к пенициллину организмов во время первоначального лечения, пенициллин все равно может быть хорошим выбором. Ключевым моментом является способность бактерий окрашивать по Граму. Megalamani et al. сообщили, что наличие грамотрицательных бактерий требует использования других антибиотиков, кроме пенициллина [20].Многие из анаэробных GNR продуцируют бета-лактамазы, особенно Bacteroides, Prevotella и некоторые виды Fusobacterium [21, 22]. Пенициллин имеет слабую активность против Bacteroides sp. и Превотелла. Он имеет только умеренную активность против Fusobacterium и исключительно хорошую активность против Porphyromonas. Следовательно, анаэробные GNR в целом устойчивы к пенициллину. Однако как стрептококки, так и анаэробные GPC проявляют высокую чувствительность к пенициллину [21, 22]. Чувствительность GPC к пенициллину также была подтверждена в нашем исследовании (таблица 4).Следовательно, мы должны проверить, содержат ли аспираты GNR (устойчивые к пенициллину организмы). Окрашивание по Граму — простой и быстрый метод его проверки. Таким образом, мы предлагаем стратегию, изображенную в таблице 5. Мы отправляем аспираты в микробиологическую лабораторию, а затем проверяем результат окрашивания по Граму. Если окрашивание по Граму показывает только GPC, лучшим вариантом лечения является пенициллин. В противном случае следует использовать клиндамицин, усиленный пенициллин и либо пенициллин, либо цефалоспорин плюс метронидазол.


Метод Грама Ожидаемые патогенные Рекомендуемые антибиотики

ГПХ аэробные, анаэробные стрептококки пенициллин

Негативные
GNR
Аэробные, анаэробные стрептококки
Анаэробные GNR (Prevotella, Fusobacterium, Bacteroides, Porphyromonas)
Клиндамицин
Пенициллин
Цефалоспорин плюс метронидазол 9013 907Заключение

GPC (как аэробный, так и анаэробный) и анаэробный GNR являются возбудителями перитонзиллярного абсцесса. Эти GPC были чувствительны к пенициллину, тогда как некоторые из GNR были устойчивы к пенициллину. Таким образом, окрашивание по Граму может определить выбор антибиотиков.

Конфликт интересов

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Бактерии под микроскопом — типы, морфология и размножение

Типы, морфология и размножение

Как и археи, бактерий являются прокариотическими клетками.Это означает, что это одноклеточные организмы без ядерной мембраны.
(ядерная оболочка). Хотя они очень маленькие, они разнообразны и различаются по размерам.
форма и размер.

Микроскопия


Перед подготовкой к микроскопии,
бактерии выращивают в питательных средах. Это помогает улучшить деление клеток и, следовательно,
увеличить их количество.

Некоторые из используемых сред включают:

Базальные среды (например, питательный бульон и пептонная вода) — Это
применяется против таких бактерий, как стафилококк, не требующих специальных
обогащение для роста

Selective Media (e.грамм. Левенштейн-Йенсен
media) — этот тип носителя используется для выращивания определенных типов, в то время как
запрещая другим.

Транспортная среда (например, среда Эмиса)
Транспортные среды особенно полезны в тех случаях, когда требуется
сохранились. Это также предотвращает разрастание бактерий до того, как они появятся.
доставлен в желаемый пункт назначения (лаборатория и т. д.).

Enriched Media (например, с добавлением крови) — Enriched media
содержат специальный компонент, добавленный в среду, чтобы способствовать росту данного
бактерии.Например, добавление крови в данную среду поддерживает
рост стрептококков.

Подготовка слайда


Требования

Порядок действий

Мазок

96200063 9000 С помощью маркировочного карандаша
отметьте кружок в центре чистого предметного стекла, чтобы отметить пятно для мазка

  • Используя либо чистый
    пипеткой или инокуляционной петлей (убедитесь, что петля запылается с помощью
    горелки) поместите каплю дистиллированной воды в отмеченное место на предметном стекле (если
    Используемая среда — бульон, дистиллированная вода не требуется)
  • Пропустить цикл посева
    снова через пламя и дайте остыть перед зачерпыванием (поверхность
    культуры) небольшое количество образца из пробирки или чашки Петри с
    посева (чтобы предотвратить загрязнение оставшейся пробы, передайте кончики
    трубки через пламя, прежде чем накрыть ее крышкой)
  • Осторожно перемешайте образец с
    капля воды на предметном стекле для создания мазка
  • Поместите предметное стекло на предметное стекло.
    сушильную стойку и дайте ей полностью высохнуть (высохнуть на воздухе)
  • Зафиксируйте мазок, пропустив
    скольжение по пламени несколько раз (примерно 3 раза) — фиксация пятна усиливает
    проникновение в ячейки
  • Процедура окрашивания бактерий


    • Поместите слайд на
      подставку для окрашивания и накройте одним из следующих пятен (пятен по грамму) для
      за одну минуту:
    1. Кристаллический фиолетовый
    2. Метиленовый синий
    3. Сафранин
    • Плавная струя
      вода вдоль предметного стекла, чтобы удалить излишки пятна
    • Вытрите излишки воды и
      пятно на краях предметного стекла с помощью впитывающей бумаги
    • Вид под микроскопом
      начиная с малой мощности (для большой мощности добавьте иммерсионное масло)

    Наблюдение (обсуждение)


    В зависимости от исследуемого образца,
    студенты будут иметь возможность наблюдать и определять размер и форму
    бактерий.Они классифицируются по форме (морфологии).
    и как они окрашивают (грамположительные и грамотрицательные бактерии).

    Морфология

    Есть несколько типов на основе
    их общий вид (форма) в том числе:

    Coccus Bacteria

    Кокковые (кокковые) бактерии являются одними из самых
    общие бактерии. Они имеют сферическую (иногда яйцевидную) форму и
    разделен на; диплококк (встречаются парами, например, Neisseria spp), стрептококк
    (происходят в виде длинной цепи или клеток, таких как Streptococcus pneumoniae) и
    стафилококки, где они встречаются группами (например,грамм. стафилококк
    saprophyticus). Кокки могут также встречаться в тетрах или пакетах от 8 до
    образуют структуру, похожую на куб, такую ​​как бактерии сарцины.

    Bacillus

    В отличие от бактерий кокциса, палочки имеют удлиненную форму.
    стержни (стержневидные) при просмотре под микроскопом. В большинстве случаев бациллы встречаются в виде отдельных клеток (например, Mycobacterium tuberculosis), но могут встречаться
    попарно (диплобациллы) или образуют цепочки, обычно называемые стрептококками
    (е.грамм. Bacillus cereus).

    Spirilla и V ibrio

    В то время как бактерии вибриона имеют форму запятой, спириллы являются
    шрифта, имеющего спиралевидную форму. Хотя некоторые люди могут запутать
    два, если смотреть под микроскопом, они разные, когда студенты
    сравните их под большим увеличением.

    Пример вибриона включает вибрион
    vulnificus и Vibrio harveyi, а некоторые примеры Spirilla включают
    представители вида Campylobacter.

    * Спириллы имеют жгутики (на обоих
    концов), которые они используют для перемещения в воде или водной среде. Это позволяет им
    двигаться быстрее в такой среде по сравнению с другими бактериями. С другой
    рука, у вибрионов есть жгутик на одном конце, который позволяет им двигаться
    о.

    Некоторые другие типы бактерий на основе
    морфология включает:

    • Spirochetes (гибкие
      спиральный бактериальный) например Spirochaetales — Спирохеты имеют осевое
      нити накала, которые позволяют им двигаться в типе движения, которое было описано как
      «Штопорное движение»
    • Актиномицеты (разветвленные)
      е.грамм. Streptosporangineae
    • Микоплазмы (отсутствие клеточной стенки
      и может выглядеть как удлиненные клетки с более толстым центральным участком или сферической формы)
      например Микоплазма человека


    Бактерии также можно сгруппировать по
    они окрашивают.

    Грамотрицательные бактерии

    Грамотрицательные бактерии
    которые не удерживают первичное пятно. Во время обесцвечивания эти бактерии
    потерять кристально-фиолетовое пятно (первичное пятно), потому что они имеют тонкую
    Пептидогликановый слой.Однако они поглощают контркрашивание (сафранин) и при просмотре под микроскопом приобретают красноватый или розовый цвет.

    Общие примеры
    грамотрицательные включают Salmonella spp, Escherichia coli (E. coli)
    и Enterobacteriaceae spp.

    Грамположительные бактерии

    В отличие от грамотрицательных, грамположительных
    бактерии имеют толстый пептидогликановый слой, который позволяет им сохранять
    первичная морилка / краситель (морилка кристаллический фиолетовый).Закрепление с помощью тепла позволяет пятну
    проникают в слой, который затем сохраняется даже при промывании клеток
    употребление алкоголя.

    При просмотре под микроскопом появляются грамположительные
    пурпурный или голубоватый цвет. Примеры грамположительных включают;
    Staphylococcus epidermidis, Bacillus cereus и Clostridium botulinum среди
    другие.

    Узнайте больше о окрашивании по Граму

    Репродукция


    Основные способы размножения бактерий
    включают:

    Двоичное деление — Двоичное деление является основным методом
    размножение.Процесс начинается с того, что клетка увеличивается в размерах и
    затем разделение на две отдельные ячейки.

    Прежде чем ячейка разделится на две,
    генетический материал должен быть скопирован и разделен на две копии, которые перемещаются в
    полярные концы клетки перед разделением цитоплазмы клетки с последующим расщеплением клетки.

    Почкование — При просмотре под микроскопом студенты могут
    можно увидеть небольшой выступ на поверхности некоторых клеток (бутон).Для
    У некоторых бактерий бутонизация является средством размножения.

    Это включает формирование
    почки на одном конце поверхности клетки с последующей репликацией генетического материала.
    Копия материала попадает в бутон, когда он увеличивается и в конечном итоге ломается.
    выключен и отделяется от родительской бактериальной клетки.

    Образование эндоспор — Это форма
    бесполое размножение грамположительных бактерий, особенно во время экстремальных, неблагоприятных
    условия.

    В таких условиях часть протопласта транспортируется рядом с хромосомой и в конечном итоге окружается стенкой сенсорной клетки, образующей
    эндоспора. Это позволяет эндоспоре выжить в экстремальных условиях.

    В благоприятном
    условия (наличие влаги, питательных веществ и правильная температура)
    прочная стенка разрушается, позволяя новой бактериальной клетке расти из
    протопласт.

    Место обитания


    Бактерии можно найти практически везде на
    земля.Это означает, что их можно найти в почве, океанах и других водах.
    тела, камни, растения и даже арктические.

    Более поздние исследования показали
    что они даже встречаются в некоторых из самых экстремальных сред, таких как
    Мертвое море и другие чрезвычайно жаркие районы.

    • Почва — например, Денитрификация
      бактерии (ответственные за преобразование нитратов в азот) и актиномицеты
      которые растут как гифы и разлагают широкий спектр субстратов в почве
    • В океане и
      морская вода
      — Vibrio
      бактерии — самый распространенный тип бактерий, обнаруживаемых в океанах.Кроме того, было показано, что Мертвое море содержит Halobacterium sp.
    • Растения — Ризобактерии
      пример бактерий, обнаруженных в корнях различных растений, где они усиливают азот
      фиксация и увеличение доступности питательных веществ.
    • Как E. coli вживую
      в кишечнике животных, где они помогают в производстве витамина К2 в
      в дополнение к предотвращению размножения болезнетворных бактерий в больших
      кишечник.

    См. Также E.Coli под микроскопом.


    Вернуться к пониманию Королевства Monera

    Подробнее о размере, форме и расположении бактерий

    Список болезней, вызываемых бактериями

    Различные типы и группы анаэробных бактерий

    Взгляните на Burkholderia Species

    — Helic Proteobacter Пилори, ризобиум, шигелла; Cyanobacteria / Schizophyta, Campylobacter

    Узнайте о серотипах и антигенах, делении клеток и плазмидах

    См. Также: Эксперименты под микроскопом, такие как йогурт под микроскопом

    Как антибиотики убивают бактерии?

    Вирус против бактерий

    Как бактерии вызывают заболевание?

    Вернуться на главную страницу прокариот

    Вернуться на главную страницу одноклеточных организмов

    Вернуться на главную страницу бактериологии

    Вернуться от бактерий под микроскопом в MicroscopeMaster Research Home


    Список литературы

    Бауман, Р.(2005) Микробиология. Пирсон Бенджамин
    Каммингс.

    http://generalbacteriology.weebly.com/culture-media.html

    https://drinc.ucdavis.edu/dairy-food-sciences/introduction-bacteria

    сообщить об этом объявлении

    DM Lab 13

    DM Lab 13

    I. ВВЕДЕНИЕ

    Нормальная флора слизистых оболочек человека насчитывает среди своих членов а

    разновидность грамположительных кокков.Два важных рода, стафилококки и

    Стрептококки представлены в сегодняшнем лабораторном упражнении.

    A. СТАФИЛОКОК

    Род Staphylococcus по большей части состоит из двух заслуживающих внимания видов:

    Золотистый стафилококк и эпидермальный стафилококк. S. aureus

    главный

    возбудителя и могут вызвать нагноение, образование абсцесса, различные гнойные

    инфекции и даже смертельный сепсис.S. epidermidis обычно непатогенный

    но может вызвать болезнь при определенных условиях. Стафилококки производят

    фермент , каталаза , что отличает их от стрептококков, которых нет.

    По определению, штаммы стафилококков, которые продуцируют фермент коагулазу , представляют собой S.

    aureus, тем самым отличая их от всех других стафилококков, которые этого не делают. Большинство

    штаммы S. aureus продуцируют недифференцируемый золотисто-желтый пигмент и зону

    чистый бета-гемолиз на агаре, содержащем кровь.Непатогенные штаммы стафилококков

    обычно образуют белые или сероватые колонии и не содержат коагулазы. Они могут быть

    гемолитический, но обычно нет.

    B. STREPTOCOCCUS

    Род Streptococcus содержит множество видов, которые считаются патогенами.

    Стрептококки, вероятно, вызывают большее разнообразие типов клинических заболеваний, чем любые

    другой род.

    Наиболее часто выделяемые и / или наиболее вирулентные штаммы стрептококков:

    • Стрептококк группы А (Streptococcus pyogenes).Эти

      бета-гемолитический,

      чувствительны к бацитрацину; вызывают сепсис, импетиго, фарингит, острый

      гломерулонефрит (АГН), ревматизм, раневые инфекции и т. д.

    • Streptococcus группы B (Streptococcus agalactiae). Это бета-гемолитические,

      резистентность к бацитрацину, положительный результат теста CAMP, и они являются основной причиной

      послеродовой сепсис и неонатальный менингит. Этот организм обычно

      изолированы от женских половых путей.

    • Стрептококк группы C . Это бета-гемолитики, устойчивые к бацитрацину, CAMP

      тест отрицательный и часто является осложняющим фактором при раневых инфекциях.

    • Стрептококк группы D . Обычно это альфа или гамма, и обычно они находятся в

      кишечного тракта. Есть две подгруппы, разделенные на основе сопротивления.

      до высоких концентраций соли.

      • Энтерококк группы D : может расти на высоких (6.5%) концентрации соли.
      • Группа D Не энтерококк : не может расти в 6,5% соли
    • Streptococcus pneumoniae — овальный диплококк, который является оптохином.

      чувствительный, а-

      гемолитическим и вызывает пневмонию, раневые инфекции, менингит, сепсис и

      отит у детей.

    Способность гемолизировать эритроциты варьируется у разных видов животных.

    Streptococcus , и это первая особенность, наблюдаемая при классификации видов.В

    Гемолитические реакции стрептококков на агаре с овечьей кровью (БАП):

    • ALPHA HEMOLYSIS — зеленоватое изменение цвета кровяного агара в

      зона вокруг колоний или под ними. Слово «вириданс» означает

      зеленый, и эти α-гемолитические стрептококки часто называют «виридансами»

      стрептококки.

    • BETA HEMOLYSIS — полный лизис эритроцитов в зоне вокруг

      отдельные колонии.В этой зоне среда становится почти

      прозрачный.

    • ГАММА-ГЕМОЛИЗ — отсутствие реакции (нет видимых изменений вокруг

      отдельные колонии). Гемолиза не происходит.

    II. ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА

    Поставляемые материалы: (индивидуально)

    • 1 пластина кровяного агара (BAP) с 1 неизвестным стафилококком
    • 1 БАТ с 1 неизвестным стрептококком
    • 1 пластина с агаром с желчью и эскулином ( розовая точка )
    • 1 6.Бульон 5% NaCl ( зеленая крышка )
    • 1 БАТ (разделен на 2 части линией маркера)
    • 1 плазменная трубка кролика ( фиолетовый колпачок )
    • 1 чашка Петри с дисками дифференциации A (бацитрацин) и P (оптохин)
    • 1 тюбик Staphylococcus aureus (в бульоне для теста CAMP) (, колпачок желтый, )
    • 1 флакон 3% перекиси водорода (h3O2)

    Процедура:

    1. У каждого ученика свои:
      • Стафилококк неизвестен с кодовым номером,
      • Streptococcus неизвестен с кодовым номером.
    2. Каждому студенту:
      • следует подготовить окраску по Граму на его / ее Стафилококк и

        Streptococcus неизвестных.

      • должен провести тест на каталазу на его / ее Staphylococcus и

        Streptococcus неизвестных. Это определит, что есть что.

      • должен выполнить тест на коагулазу на его / ее Staphylococcus unknown.
      • следует привить его / ее Streptococcus неизвестно о подходящем

        пластины, как описано ниже.

      • должен определить гемолиз его / ее неизвестного Streptococcus

        и при необходимости настройте тест на чувствительность к бацитрацину или оптохину. (Если

        этот тест проводится на неизвестном стафилококке, баллы будут

        вычтено.)

    ТЕСТ КАТАЛАЗА:

    Тест каталазы различает группы микроорганизмов на основе

    производство каталазы.Этот тест неизменно положительный на стафилококки и отрицательный.

    на стрептококки. Каталаза — это фермент, который расщепляет перекись водорода на воду и

    кислород. Выделяемый кислород выглядит как крошечные пузырьки.

    1. Возьмите 1 или 2 изолированные колонии стерильной петлей и распределите по

      слайд. Не добавляйте физиологический раствор. Не включайте агар; клетки крови имеют

      каталаза в них.

    2. Добавьте в мазок 1 каплю 3% перекиси водорода и найдите

      энергичное выделение пузырьков.Пузырьки указывают на положительную реакцию на каталазу.

      РОД КАТАЛАЗНАЯ РЕАКЦИЯ
      Streptococcus Без пузырьков (без каталазы)
      Стафилококк Пузырьки (присутствует каталаза)

    ТЕСТ КОАГУЛАЗЫ:

    Коагулазный тест — самый надежный индикатор патогенных токсинов.

    штаммы Staphylococcus, i.е., на золотистый стафилококк. Наиболее патогенные штаммы

    Стафилококки продуцируют простафилкоагулазу, которая вступает в реакцию с активатором, аналогичным

    протромбин с образованием активного свертывающего агента, коагулазы. Коагулаза, в свою очередь, реагирует

    с фибриногеном, образующим фибрин для свертывания плазмы.

    1. Используйте стерильную петлю для посева, чтобы удалить тяжелый посевной материал с вашего

      предположительный стафилококк неизвестен (определяется окраской по Граму и

      Каталазный тест).

    2. Эмульгировать этот рост в 1 пробирку с кроличьей плазмой, на этикетке со своим именем,

      и поместите в инкубатор 37C до следующего лабораторного периода.

    3. После инкубации обратите внимание на свертывание плазмы, наклонив плазменную трубку.

      и наблюдайте, затвердела жидкость или нет ( не проливать ).

    ОРГАНИЗМ ПРОИЗВОДСТВО КОАГУЛАЗЫ
    Staphylococcus aureus Сгусток (продуцируемый коагулазой)
    Staphylococcus epidermidis Нет сгустка (без коагулазы)

    ИДЕНТИФИКАЦИЯ ГРУППЫ STREPTOCOCCUS:

    Чтобы определить ваш стрептококк как неизвестный, сначала необходимо его классифицировать.

    на основе его способности лизировать эритроциты барана (гемолиз).

    1. Тщательно исследуйте неизвестный БАТ (смотрите только на изолированные колонии на наличие

      это определение) и принять решение на основании следующих описаний, и

      демонстрационные тарелки за передним столом, какие из 3-х видов гемолиза

      ваши неизвестные экспонаты.

    АЛЬФА-ГЕМОЛИЗ:

    Неполный лизис эритроцитов с образованием зеленой окраски, окружающей колонию.

    БЕТА-ГЕМОЛИЗ:

    Полное разрушение эритроцитов с высвобождением гемоглобина.Полянка вокруг колонии.

    ГАММА-ГЕМОЛИЗ:

    Никаких изменений в среде.

    1. Если ваша неизвестная стрептококковая инфекция обнаруживает a-гемолиз , то она может принадлежать к Группе

      D, может быть Streptococcus pneumoniae или Viridans streptococcus. Полосите свой

      неизвестно одной половине БАТ и поместите один диск Optochin в область

      плотнейшая прививка. Затем используйте стерильную петлю для инокуляции желчи-эскулина.

      Чашка с агаром и 6.5% -ный бульон NaCl с неизвестным стрептококком. (Сделай это

      только в том случае, если ваш неизвестный образец демонстрирует a-гемолиз.)

    2. Если ваша неизвестная стрептококковая инфекция обнаруживает b-гемолиз , то проведите полосу вашего неизвестного до

      одну половину БАТ и поместите один диск с бацитрацином в область наиболее плотного

      прививка. Используйте другую половину BAP для теста CAMP (см.

      диаграмму). Разбейте свою неизвестную Strep-болезнь. по прямой через изогнутую

      сторона тарелки. Стерилизуйте иглу и нанесите штрихи на золотистый стафилококк.

      (Бульон , а не тарелка ) перпендикулярно вашей неизвестной полосе, оставляя 1 см

      пространство между ними .

    3. Если у вашей неизвестной стрептококковой инфекции нет гемолиза (g) , проигнорируйте шаги b и c.

      Вместо этого используйте стерильную петлю для инокуляции чашки с желчно-эскулиновым агаром и

      Бульон с 6,5% NaCl с неизвестным стрептококком.

    4. Инкубируйте чашки BAP в сосуде для свечей при 37 ° C до следующего лабораторного периода.

      Поместите бульон желчи-эскулина и 6,5% NaCl в инкубатор 37 ° C. Будь уверен

      напишите свое имя на всех своих материалах.

    5. Обратите внимание, что если культура стрептококка чувствительна к бацитрацину или оптичину, вы

      увидит область без роста вокруг диска.

    6. Выбросьте неизвестные пластины BAP. Материалы хранятся более 24 часов. довольно часто

      давать неубедительные или ошибочные результаты.

    ПРОЦЕДУРА ИСПЫТАНИЯ В ЛАГЕРЕ:

    CAMP-тест, проведенный на полноразмерной пластине с кровяным агаром. Обратите внимание

    усиленный гемолиз

    в форме стрелки.

    СЛЕДУЮЩИЙ ПЕРИОД ЛАБОРАТОРИИ

    1. Прочтите и запишите результаты неизвестных вам и вашему партнеру на

      Лист отчета, используя приведенную ниже таблицу:

      ИДЕНТИФИКАЦИЯ СТРЕПТОККУСА
      Группа Гемолиз Бацитрацин
      Чувствительность
      CAMP
      Тест
      Желчь-
      Эскулин
      Агар
      6.5%
      NaCl
      Бульон
      Оптохин
      Чувствительность
      A Бета +
      B Бета +
      C Бета
      D
      Enterococcus
      Alpha или
      Gamma
      + +
      D
      Non-Enterococcus
      Alpha

      или
      Гамма

      +
      Viridans Alpha +
      Streptococcus
      pneumoniae
      Alpha + +

    2. В конце этого лабораторного периода сдайте свой отчетный лист, помеченный вашим

      имя и неизвестные номера.



    Несмотря на то, что прилагаются все усилия, чтобы эта информация была актуальной и точной, заявления

    найденные на этой странице предназначены только для информационных целей. Политика публикации

    LSUMC WWW, 23.09.96

    Микроскопия и окрашивание: окрашивание по граммам, капсулам и эндоспорам

    Бактерии — это микроскопические живые организмы, которые обладают многими отличительными характеристиками, такими как форма, расположение клеток, образуют ли они капсулы или нет, и образуют ли они споры.Все эти особенности можно визуализировать путем окрашивания и помочь в идентификации и классификации различных видов бактерий.

    Чтобы изучить первые две характеристики формы и расположения клеток, мы можем использовать простой метод, называемый окрашиванием по Граму. Здесь кристаллический фиолетовый применяется к бактериям, прикрепленным к предметному стеклу. Затем наносится обесцвечивающее средство, и любые бактерии с толстым пептидогликановым слоем окрашиваются в фиолетовый цвет, так как обесцвечивающее средство не может легко проникнуть в этот слой.Эти бактерии называются грамположительными.

    Грамотрицательные бактерии имеют более тонкий слой пептидогликана и обесцвечивают средство для обесцвечивания, теряя пурпурный цвет. Тем не менее, они будут окрашиваться в красновато-розовый цвет, когда добавляется контрастное краситель сафранина, который связывается с липополисахаридным слоем на их внешней стороне. После окрашивания клетки можно наблюдать на предмет морфологии, размера и расположения, например, в цепочках или кластерах, что дополнительно помогает в классификации и идентификации.

    Другой полезный метод в наборе инструментов микробиолога — это окрашивание капсул, используемое для визуализации внешних капсул, окружающих некоторые типы бактериальных клеток.Из-за неионного состава капсул и их способности отталкивать пятна простые методы окрашивания не работают. Вместо этого используется метод негативного окрашивания, при котором сначала окрашивается фон кислотным красителем, таким как Конго красный, до того, как бактериальные клетки окрашиваются кристаллическим фиолетовым. Это оставляет любую капсулу в виде четкого ореола вокруг клеток.

    Последний основной метод окрашивания, описанный здесь, может помочь определить, образуют ли исследуемые бактерии споры. В неблагоприятных условиях некоторые бактерии образуют эндоспоры, спящие, жесткие, не репродуктивные структуры, основная функция которых заключается в обеспечении выживания бактерий в периоды стресса окружающей среды, такого как экстремальные температуры или обезвоживание.Однако не все виды бактерий образуют эндоспоры, и их трудно окрашивать стандартными методами, поскольку они непроницаемы для многих красителей. В методе Шеффера-Фултона используется окраска малахитовым зеленым, которую наносят на бактерии, зафиксированные на предметном стекле. Затем предметное стекло промывают водой перед контр-окрашиванием сафранином. Вегетативные клетки будут розовато-красными, а эндоспоры — зелеными. Из этого видео вы узнаете, как применять эти распространенные методы окрашивания бактерий, а затем исследовать образцы окрашивания с помощью световой микроскопии.

    Чтобы начать процедуру, соберите длинные волосы и наденьте соответствующие средства индивидуальной защиты, включая лабораторный халат и перчатки.

    Затем очистите свежее предметное стекло микроскопа лабораторной салфеткой. Затем нанесите пипеткой 10 мкл физиологического раствора с фосфатным буфером 1X на первое предметное стекло. Затем используйте стерильный наконечник пипетки, чтобы выбрать одну бактериальную колонию из чашки с агаром LB. Смажьте бактериальные колонии в жидкости, чтобы получить тонкий ровный слой. Установите слайд на столешницу и дайте ему полностью высохнуть на воздухе.

    После высыхания зажгите горелку Бунзена, чтобы разморозить бактерии. Используя щипцы, пропустите предметное стекло через пламя горелки несколько раз бактериальной стороной вверх, стараясь не удерживать предметное стекло в пламени слишком долго, что может исказить клетки.

    Теперь, работая над раковиной, удерживайте предметное стекло на уровне и нанесите несколько капель кристаллического фиолетового Грама, чтобы полностью покрыть бактериальный мазок, а затем поместите предметное стекло на стол, чтобы оно оставалось на 45 секунд. Затем, удерживая предметное стекло под углом, аккуратно нанесите струю воды на верхнюю часть предметного стекла, стараясь не разбрызгивать бактериальный мазок напрямую.Теперь, снова удерживая предметное стекло, нанесите раствор йода Грама, чтобы полностью покрыть окрашенные бактерии, а затем дайте ему постоять еще 45 секунд. Затем осторожно смойте йод с предметного стекла, как показано ранее. Удерживая предметное стекло под углом, добавьте на предметное стекло несколько капель обесцвечивающего средства по Граму, позволяя ему стечь по окрашенным бактериям, пока стекло не станет прозрачным, в течение примерно 5 секунд. Немедленно промойте водой, как показано ранее. Это ограничит чрезмерное обесцвечивание мазка.Затем, снова удерживая уровень предметного стекла, нанесите контркраску сафранином Грама, чтобы полностью покрыть окрашенные бактерии. Через 45 секунд осторожно промойте сафранин с предметного стекла водой, как показано ранее, а затем промокните насухо бумажными полотенцами.

    Наконец, добавьте каплю иммерсионного масла непосредственно на предметное стекло, а затем изучите предметное стекло с помощью светового микроскопа с масляной линзой 100X.

    Чтобы начать этот протокол окрашивания, сначала наденьте соответствующие средства индивидуальной защиты, а затем убедитесь, что стеклянные предметные стекла, которые будут использоваться, чистые.

    Далее готовим решения. Чтобы приготовить 1% раствор кристаллического фиолетового, смешайте 0,25 грамма порошка кристаллического фиолетового с 25 миллилитрами дистиллированной воды и встряхивайте до растворения. Затем приготовьте 1% раствор конго красного, смешав 0,25 грамма порошка конго красного с 25 миллилитрами дистиллированной воды и взбалтывая до растворения. Теперь нанесите пипеткой 10 микролитров раствора Конго красного на предметное стекло. Используя чистый стерильный наконечник пипетки, выберите одну бактериальную колонию из чашки с агаром LB. Затем нанесите бактериальную колонию на краситель, чтобы получился тонкий ровный слой.Полностью высушите предметное стекло на воздухе в течение 5-7 минут. Когда слайд высохнет, залейте мазок 1% кристаллическим фиолетовым, чтобы он покрыл его, и оставьте на 1 минуту. Теперь, удерживая предметное стекло под углом, аккуратно нанесите струю воды на верхнюю часть предметного стекла, стараясь не разбрызгивать бактерии напрямую. Продолжайте удерживать слайд под углом 45 градусов до полного высыхания на воздухе. Наконец, добавьте каплю иммерсионного масла непосредственно на предметное стекло, а затем изучите предметное стекло с помощью светового микроскопа с масляным объективом 100X.

    Для окрашивания эндоспор сначала приготовьте 0,5% раствор малахитового зеленого, смешав 0,125 г порошка малахитового зеленого с 25 миллилитрами дистиллированной воды, а затем встряхните раствор до растворения. Затем нанесите пипеткой 10 микролитров 1X PBS в центр предметного стекла. Затем используйте стерильный наконечник пипетки, чтобы выбрать одну бактериальную колонию из чашки с агаром LB. Размажьте бактерии в жидкости, чтобы получился тонкий ровный слой. Теперь установите слайд на столешницу и дайте ему полностью высохнуть на воздухе.После высыхания зажгите горелку Бунзена, чтобы разморозить бактерии. Пропустите слайд через голубое пламя горелки несколько раз бактериальной стороной вверх. Затем, когда предметное стекло остынет, поместите кусок предварительно вырезанной бумаги для линз поверх закрепленного нагреванием мазка. Затем включите конфорку на максимальную мощность и доведите до кипения стакан воды.

    Пропитайте бумагу для линз раствором малахитового зеленого и с помощью щипцов поместите предметное стекло на стакан с кипящей водой для пара в течение 5 минут.Держите бумагу для линз влажной, добавляя больше красителя, по капле за раз, по мере необходимости. Затем, снова используя щипцы, возьмите предметное стекло из стакана, удалите и выбросьте бумагу для линз. Дайте слайду остыть в течение 2 минут. Работая над раковиной, держите горку под углом и аккуратно брызните струей воды на верхнюю часть горки. Теперь, удерживая слайд на уровне, нанесите сафранин, чтобы полностью покрыть слайд. Затем дайте ему постоять 1 минуту. Затем, удерживая слайд под углом, промойте, как показано ранее.Дайте слайду высохнуть на воздухе на столе. Наконец, добавьте каплю иммерсионного масла прямо на предметное стекло, а затем изучите предметное стекло с помощью светового микроскопа с масляным объективом 100X.

    В протоколе окрашивания по Граму могут образоваться пятна двух разных цветов. Темно-пурпурное окрашивание указывает на то, что бактерии грамположительны и сохранили окраску кристально-фиолетовым. Напротив, красновато-розовое окрашивание характерно для грамотрицательных бактерий, которые вместо этого окрашиваются контркрашением сафранина.Кроме того, после окрашивания по Граму можно визуализировать различные формы и расположение бактерий. Например, можно отличить кокки, или круглые бактерии, от палочковидных бацилл или идентифицировать бактерии, образующие нити, по сравнению с бактериями, которые обычно собираются в сгустки или встречаются по отдельности.

    На микроскопическом изображении, окрашенном капсулой, бактериальные клетки обычно окрашиваются в фиолетовый цвет, а фон предметного стекла должен быть окрашен в темный цвет. На этом темном фоне капсулы бактерий, если они есть, будут выглядеть как четкий ореол вокруг клеток.

    Наконец, при окрашивании эндоспор вегетативные клетки будут окрашены в красный цвет контркрашением сафранина. Если в образце присутствуют эндоспоры, они сохранят окраску малахитового зеленого цвета и будут иметь голубовато-зеленый цвет.

    Грамположительный и грамотрицательный

    Загрузите версию статьи в формате pdf здесь

    Возможность различать виды бактерий важна по целому ряду причин, от диагностики инфекции или проверки безопасности пищевых продуктов до определения того, какой вид вызывает сыр это фантастический характер.Виды бактерий и даже определенные штаммы можно дифференцировать с помощью ряда молекулярных методов, таких как ПЦР, количественная ПЦР, секвенирование генома и масс-спектрометрия. Но даже не вдаваясь в молекулярную мелочь, можно сказать, что существуют фенотипические различия между группами бактерий, которые можно использовать для их дифференциации. Это включает такие характеристики, как их форма (например, бациллы против кокков), рост определенных питательных веществ и предпочтение среды с высоким или низким содержанием кислорода. В зависимости от изучаемой характеристики виды бактерий могут быть разбиты на широкие группы, но вместе эта информация может значительно сузить возможные идентичности.Одна из таких полезных классификаций — если бактерия является грамположительной или грамотрицательной — основана на структуре стенок бактериальных клеток.

    Различия в структуре грамположительных и грамотрицательных бактерий


    На приведенной ниже диаграмме показаны различия в структуре грамположительных и грамотрицательных бактерий. Двумя ключевыми особенностями, которые приводят к разным визуальным свойствам грамположительных и грамотрицательных видов, являются толщина пептидогликанового слоя и наличие или отсутствие внешней липидной мембраны.Это связано с тем, что структура стенки влияет на способность клетки сохранять окраску кристаллическим фиолетовым, используемую в процедуре окрашивания по Граму, которую затем можно визуализировать под световым микроскопом.

    Грамположительные бактерии имеют толстый пептидогликановый слой и не имеют внешней липидной мембраны, в то время как грамотрицательные бактерии имеют тонкий пептидогликановый слой и внешнюю липидную мембрану.

    Поскольку грамположительные бактерии лишены внешней липидной мембраны, при правильном указании на их структуру, а не на свойства окрашивания, их называют монодермами.Внешняя липидная мембрана, которой обладают грамотрицательные бактерии, означает, что в отношении их физической структуры их называют дидермиями.


    Метод окрашивания по Граму был разработан в 1884 году датским бактериологом Хансом Кристианом Грамом 1 . Несмотря на то, что окраска по Граму не скажет вам конкретный вид, на который вы смотрите, это может быть быстрый способ значительно сузить список потенциальных кандидатов и, при необходимости, провести последующее тестирование.

    Грамположительное и грамотрицательное окрашивание



    Процедура окрашивания по Граму — Подготовка образца

    1. Пометьте чистое стекло микроскопа идентификатором образца. Убедитесь, что вы используете карандаш, так как многие чернила удаляются реагентами, использованными в процедуре окрашивания.

    2. При приготовлении предметного стекла из жидкой бактериальной культуры:

    Нанесите небольшую капельную культуру на предметное стекло с помощью стерильной петли. Аккуратно смажьте каплю круговыми движениями на область диаметром примерно 1 см. Для очень плотных культур может потребоваться предварительное разбавление вашей культуры, чтобы отдельные бактериальные клетки можно было увидеть под микроскопом после окрашивания.

    Если исходный материал взят из бактериального планшета:

    Ресуспендируйте петлю материала колоний в стерильном фосфатно-солевом буфере (PBS), а затем действуйте так же, как для жидкой культуры.

    3. После высыхания мазка на воздухе пропустите смазанное предметное стекло через пламя два или три раза.

    Это убивает микробы в мазке и фиксирует образец на предметном стекле, однако будьте осторожны, чтобы не перегреть образец, так как это может исказить морфологию клеток.

    Процедура окрашивания по Граму — окрашивание образца по Граму

    1. Аккуратно залейте мазок кристально-фиолетовым и оставьте на 1 минуту. Слегка наклоните предметное стекло и осторожно промойте водопроводной или дистиллированной водой.

    Кристаллический фиолетовый — водорастворимый краситель, который проникает в слой пептидогликана в клеточной стенке бактерий.

    2. Аккуратно залейте мазок йодом по Граму и оставьте на 1 минуту. Слегка наклоните предметное стекло и осторожно промойте водопроводной или дистиллированной водой. Мазок станет фиолетовым.

    Раствор йода по Граму (йод и йодид калия) добавляют для образования комплекса с кристаллическим фиолетовым, который намного больше по размеру и не растворяется в воде.

    3. Обесцветьте мазок 95% этиловым спиртом или ацетоном. Слегка наклоните слайд и наносите спирт по каплям, пока спирт не станет почти прозрачным (5-10 секунд). Немедленно смойте водой, чтобы избежать обесцвечивания.

    Обесцвечивающее средство обезвоживает слой пептидогликана, сжимая и стягивая его. У грамположительных бактерий большие комплексы кристаллического фиолетового и йода не могут проникать и выходить из толстого пептидогликанового слоя, что приводит к окрашиванию пурпурным цветом клеток.Однако у грамотрицательных бактерий внешняя мембрана разрушена, тонкий слой пептидогликана неспособен удерживать комплексы кристаллического фиолетового иода, и цвет теряется.

    4. Осторожно залейте сафраниновым контрастным красителем и оставьте на 45 секунд. Слегка наклоните предметное стекло и осторожно промойте водопроводной или дистиллированной водой.

    Сафранин слабо растворим в воде и окрашивает бактериальные клетки в светло-красный цвет, что позволяет визуализировать грамотрицательные клетки, не мешая наблюдению за пурпурным цветом грамположительных клеток.

    5. Промокните предметное стекло на фильтровальной бумаге, затем просмотрите мазок с помощью светового микроскопа в масляной иммерсии.

    Грамположительные и грамотрицательные цвета

    Грамположительные бактерии


    Грамположительные бактерии имеют характерный фиолетовый вид при наблюдении под световым микроскопом после окрашивания по Граму. Это связано с сохранением пурпурного кристаллического фиолетового пятна в толстом пептидогликановом слое клеточной стенки.Примеры грамположительных бактерий включают все стафилококки, все стрептококки и некоторые виды листерий.

    Грамотрицательные бактерии


    Грамотрицательные бактерии выглядят бледно-красноватыми при наблюдении под световым микроскопом после окрашивания по Граму. Это связано с тем, что структура их клеточной стенки неспособна удерживать окраску кристаллического фиолетового цвета, поэтому они окрашиваются только контрастной окраской сафранина. Примеры грамотрицательных бактерий включают энтерококки, виды сальмонелл и виды псевдомонад.

    Окрашивание по Граму нельзя надежно использовать для оценки филогенетических взаимоотношений бактерий. Одиночная мембрана грамположительных видов считается предковым состоянием. Исторически считалось, что вторая мембрана, обнаруженная на грамотрицательных бактериях, эволюционировала только один раз, и поэтому все грамотрицательные виды были более тесно связаны друг с другом, чем с грамположительными видами. Однако генетический анализ с тех пор показал, что это не так, и, вероятно, он эволюционировал несколько раз в разных линиях — продукт конвергентной эволюции.

    Каталожный номер

    1. Грамм, H.C. (1884). «Über die isolierte Färbung der Schizomyceten in Schnitt- und Trockenpräparaten». Fortschritte der Medizin (на немецком языке). 2: 185–189.

    Считаете эту статью полезной? Скачать копию здесь.

    .