Грамм палочки в мазке что это: «Мазок на флору»: о чём расскажет анализ?

Бактериоскопические исследования – SYNLAB Eesti

Интерпретация результатов бактериоскопии

Прямая микроскопия нативного материала является частью клинического исследования пациента, цель которого – определить морфологию микроорганизмов и наличие воспалительной реакции со стороны организма.

Показания: Прямая микроскопия нативного материала дает информацию о общем состоянии генитального тракта, позволяет оценить наличие и интенсивность воспалительной реакции, зрительно оценить клетки слизистой оболочки и имеющиеся микробы. При известных инфекциях прямая микроскопия имеет диагностическую ценность (гонорея у мужчин, трихомоноз).

Исследуемый материал: Соскоб из цервикального канала, влагалища, уретры (на предметное стекло)

Метод анализа: Микроскопия

Соответственно международным стандартам у каждого пациента необходимо смотреть два препарата, окрашивая их по методу Грама и Лейшману-Гимза.

Методика окраски по Лейшману-Гимза является основной методикой для определения инфекции Trichomonas и внутриклеточных микроорганизмов, также эта методика очень информативна для исследования клеточных элементов; позволяет оценить отличия эпителия генитального тракта (вагинальный, эндоцервикальный, слизистая оболочка уретры).

На основе методики окраски по Граму микробы подразделяются на Грам-положительные и Грам-отрицательные. В диагностике бактериального вагиноза это основной метод окраски, поскольку он позволяет определить критерии Nugent.

Интерпретация результата:

ЭПИТЕЛИАЛЬНЫЕ КЛЕТКИ

  • Суперфициальные. Максимального своего числа (96%) достигают во время овуляции. К 27-28 дню цикла их число падает до 4%.  
  • Интермедиарные. Составляют большую часть клеток в первые (74-76%) и последние (96%) дни цикла. Минимальное их количество во время овуляции (3,5%).
  • Парабазальные. У женщин репродуктивного возраста имеются в препарате только во время менструации. Также их часто можно обнаружить при низком уровне эстрогенов.
  • Базальные. В препарате здоровых женщин не определяются. Обнаружение базальных клеток указывает на наличие воспалительного процесса слизистой или травматического повреждения. При воспалении также имеется множество лейкоцитов.
    NB!
    Парабазальные и базальные клетки также являются отличительным признаком атрофического вагинита.
  • Спонтанно отслоившиеся клетки эндометрия. У женщин репродуктивного возраста их можно обнаружить первые 12 дней после менструации. Обнаружение клеток эндометрия во второй фазе цикла свидетельствует о наличии эндометрита, полипа эндометрия или связано с использованием внутриматочного контрацептивного средства.

 

ЛЕЙКОЦИТЫ

  • Нейтрофилы. Клетки острой фазы. В препарате можно обнаружить следующие патологические формы:
    • гиперсегментированные: число ядерных сегментов 6 и более, величина клеток может превышать 15 μm. Возникают при мегалобластной и пернициозной анемии, хронической инфекции и применении химиотерапии. 
    • гипосегментированные: число ядерных сегментов 3 и меньше. Возникают при некоторых инфекциях и на фоне применения химиотерапии (особенно препаратов группы сульфонамидов).
  • Моноциты или мононуклеарные фагоциты.
    Отвечают за хроническую фазу воспаления.
  • Эритроциты. У некоторых женщин определяются в период овуляции и перед мен- струацией.

 

СООТНОШЕНИЕ ПОЛИМОРФОНУКЛЕАРНЫХ ЛЕЙКОЦИТОВ ПМН И ЭПИТЕЛИАЛЬНЫХ КЛЕТОК

  • У здоровых женщин это соотношение менее, чем 1:1.
  • Пропорции клеток 2:1 и 3:1 и более, являются маркером острого воспаления.  

 

МИКРООРГАНИЗМЫ

Нормальная микробиота у мужчин

Уретра Семенная жидкость

Доминирует грамм-положительная микрофлора. Самое богатое микроорганизмами место это дистальная часть уретры и самая бедная – спонгиозная часть.

Наиболее частые изоляты:

  • Альфа-гемолитические стрептококки группы: Streptococcus salivarius, S. sanguis, S. intermedius и др.
  • Коагулазонегативные: Staphylococcus haemolyticus, S. auricularis, S. hominis, S. epidermidis 
  • Enterococcus spp., Corynebacteria

Реже и в небольшом количестве встречаются S.aureus, S. pyogenes, стрептококки B группы, Enerobacter spp. и микрококки

Нестерильная число микробов варьирует инди- видуально от 10²
до 107 PMÜ/mL.

 

Нормальная микробиота у женщин

Наружные гениталии Уретра Влагалище
• S. epidermidis
• Viridans стрептококки
• Peptostreptococcus spp.
• Corynebacteria
• Mycobacteria
• Enterobacteriaceae
• S. aureus и CONS
• Enterococcus
• Neisseria (авирулент-
ные)
• Corynebacteria
• Mycobacteria
• Enterobacteriaceae
• Gardnerella vaginalis
• Mycoplasma
• Грибки

Аэробы:
• Difteroidid
• Streptococcus spp.
• S. aureus
• S. epidermidis
• Enterobacteriaceae

Микроаэрофилы и анаэробы:
• Лактобациллы
• Peptostreptococcus
• Peptococcus
• Clostridium
• Eubacterium
• Bifidobacterium
• Gardnerella vaginalis
• Candida

• Actinomyces
• Ureaplasma urealyticum
• Mycoplasma hominis

 

ГРАМ ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЕ ПАЛОЧКИ

  • Genus Lactobacillus. Их количество в препарате колеблется циклично, больше всего их можно обнаружить на фоне овуляции (10-14 день). Иногда множество лактобацилл имеется на 19-23 день цикла, что может вызвать цитолиз промежуточных клеток.
  • Genus Corynebacterium. Большинство представителей этого вида факультативные или же непатогенные.

 

ГРАМ ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЕ КОККИ 

  • Genus Staphylococcus
    • S. aureus в сообществе с E. coli, и стрептококками группы В и Trichomonas vaginalis может вызывать аэробный вагинит. На наличие аэробного вагинита указывает большое количество парабазальных клеток и лейкоцитов (также их гранулярный аспект).
    • S. epidermidis является важнейшим фактором уретрита и простатита у молодых (42%).
    • Увеличилась частота возникновения бактериурии с S. saprophyticus у молодых женщин. Также при инфекции амниона у беременных женщин может быть изо- лирован из материала цервикального канала.
  • Genus Streptococcus
    • S. agalactiae (стрептококк В группы) колонизируется на слизистой оболочке половых путей 5-40% женщин. Вульвовагинит же может возникнуть только тогда, когда их число достигнет не менее 108 PMÜ/g, а также будет определяться одновре- менно E. coli и S. aureus. Часто может быть одновременно с Candida albicans (55%).

 

ACTINOMYCES

Имеется в полости рта здоровых людей и на слизистой оболочке половых путей женщин. В качестве колонизирующего микроорганизма может быть у женщин, использующих внутриматочные противозачаточные средства (7%). Достаточно часто Actinomyces сопровождается Entamoeba gingivalis. Может быть причиной симптоматической инфекции.

 

ГРАМ НЕГАТИВНЫЕ ПАЛОЧКИ

  • Представители Enterobacteriaceae
    • Наиболее частые возбудители инфекций уротракта это Escherichia coli, Proteus spp., Klebsiella spp., Pseudomonas spp.
    • Диагностическую ценность имеет обнаружение E. coli в больших количествах, особенно вместе с другими энтеробактериями и на фоне PMN либо же с BV- микробами.

 

ГРАМ НЕГАТИВНЫЕ КОККИ 

  • N. gonorrhoeae (гонококки)
  • N. meningitidis (менингококки)
  • Другие представители Neisseria с относительно низкой патогенностью изолируются из дыхательных путей. N. lactamica часто изолируется из урогенитального тракта.
  • Genus Acinetobacter. В большинстве своем кокобациллы или диплококки. Изоли- руются из слюны, мокроты, мочи и влагалищного секрета.  
  • Genus Moraxella. Морфологически неотличимы от нейсерий. В некоторых случаях можно обнаружить M. catarrhalis среди полиморфных лейкоцитов.

 

GARDNERELLA VAGINALIS

Имеется в микрофлоре у 45-58% здоровых женщин репродуктивного возраста и у 27% женщин в период менопаузы.

 

LEPTOTRICHIA

Относительно низкой патогенности. Возникает обычно на фоне трихомоноза, бактериального вагиноза или длительного курса противовоспалительного лечения.

 

ДИАГНОЗ БАКТЕРИАЛЬНОГО ВАГИНОЗА ПО КРИТЕРИЯМ NUGENT

  • Различное число морфотипов в препарате, окрашенном по Граму
  • Норма 0-3
  • Пограничное значение 4-6
  • Бактериальный вагиноз >7

 

ДИАГНОЗ БАКТЕРИАЛЬНОГО ВАГИНОЗА ПО КРИТЕРИЯМ AMSEL

  • Гомогенные молокообразные выделения из влагалища
  • Положительный аминовый тест
  • Ph >4,5
  • Микроскопическая находка: клетки „clue“ (~20%) Gardnerella, Mobiluncus и др.

 

ГРИБЫ

  • Бластоспоры, лейкоцитов мало или отсутствуют – колонизация
  • Бластоспоры, лейкоцитов много – Candida non-albicans, необразующая псевдомицелий
  • Бластоспоры, лейкоцитов много – инфекция Candida albicans  

 

Мазок на флору у женщин

Мазок на флору у женщин берется в диагностических целях, этот анализ позволяет обнаружить атипичные клетки, оценить гормональный баланс и выявить признаки некоторых гинекологических заболеваний.

Назначают сдачу мазка женщинам в профилактических целях, а также в случае проявления симптомов болезней мочеполовой системы и при наличии жалоб: зуд в области влагалища, выделения, не связанные с менструацией, боль внизу живота. Обязательно такой анализ показан после длительного лечения антибиотиками и во время планирования беременности. Процедура безболезненна и не несет вреда.

 

Как проходит взятие мазка на флору

Чтобы результат мазка на флору был достоверным и информативным нужно соблюсти некоторые условия.

Что включает подготовка (за два дня до процедуры):

  • Отказ от половой жизни;
  • Запрет на свечи и таблетки для влагалища.
  • Нельзя использовать моющие средства.
  • Воздержание от купания в ванной.
  • Нельзя проводить спринцевание.
  • Мазок не сдается в период менструации.

Также гинекологи не рекомендуют своим пациенткам за несколько часов до взятия анализа мочиться. Берется мазок специальным стерильным шпателем со слизистой влагалища, шейки матки и мочеиспускательного канала во время гинекологического осмотра.

Норма показателей в мазке на флору

Мазок отправляют в лабораторию и после исследования выдаются результаты – написанные на листке буквы и цифры, обычным людям без медицинского образования они вряд ли будут понятны. На самом деле расшифровка анализа несложная, если известны нормативные показатели.

Нормальные показатели мазка взрослой здоровой женщины:

  • L (лейкоциты) – в мочеиспускательном канале и влагалище таких клеток должно быть не более 10, а в районе шейки матки менее 30.
  • Плоский эпителий – в поле зрения допускается наличие 15 клеток, если их больше, значит, прогрессирует воспаление, а недостаток свидетельствует о гормональном сбое.
  • Слизь – может присутствовать в небольшом количестве.
  • Палочки Дедерлейна – их должно быть много, недостаток лактобацилл признак нарушенной микрофлоры влагалища.
  • Зоны, из которых берут мазок, обозначаются такими буквами: U (мочеиспускательный канал), V (вагина), C (шейка матки).

Во время анализа должна определяться и степень чистоты. Первая степень диагностируется у абсолютно здоровых женщин, в их микрофлоре 95% лактобактерий, а лейкоцитов и эпителия единичные клетки. Вторая степень практически не отличается от первой, но в небольшом количестве могут быть выявлены условно-патогенные бактерии. Третья степень чистоты свидетельствует о превышении численности условно-патологических бактерий (больше, чем палочек Дедерлейна). При четвертой степени лактобацил практически не обнаруживается, зато много бактериальной флоры, эпителия и лейкоцитов. Лечить нужно два последних варианта.

Если в образцах мазка есть гонококки, трихомонады, грибы семейства Кандида или другие микроорганизмы, значит, в организме пациентки развивается воспалительное заболевание. В этом случае могут быть назначены дополнительные анализы для подбора наиболее эффективной терапии.

Что можно увидеть в результате исследования

Мазок на флору, если он проведен правильно и женщина придерживалась рекомендаций по подготовке, позволяет выявить воспалительные процессы, которые развиваются из-за наличия патогенных микроорганизмов.

Распространённые болезни, выявляемые в ходе исследования:

  • Цервицит – поражает канал шейки матки. Патология имеет воспалительную природу.
  • Вагинит – болезнь, которая пагубно влияет на влагалищные стенки.
  • Кандидоз – молочница возникает из-за чрезмерного наличия во флоре женщины Кандид.
  • Вагиноз бактериального типа – развивается в случае изменения состава микрофлоры влагалища.

Кроме того, анализ мазка на флору позволяет выявить ряд заболеваний, передающихся половым путем. Если были обнаружены гонококковые патогенные микроорганизмы, то это свидетельствует о развитии гонореи. Во время исследования можно обнаружить хламидиоз, трихомониаз, микоплазмоз и уреаплазмоз. Точный диагноз способен поставить только гинеколог, после изучения результатов анализов и тщательного осмотра пациентки.

Автор: Лаврова Нина Авенировна

Заместитель генерального директора по медицинской части

Окончила Ярославский государственный медицинский институт по специальности «Лечебное дело»
Медицинский опыт работы - 25 лет

Записаться к врачу

ОТЗЫВЫ КЛИЕНТОВ

Евгения

Была на приёме у гинеколога Ольги Александровны, была только один раз, но врач показался очень квалифицированный, далее судить буду в процессе лечения, и отпишусь. Клиника платная, но деньги не дерут! Профессионализм на высшем уровне, а цены ниже чем во многих псевдоклиниках. Девушка на телефоне очень приятная и уважительно относится к клиентам, старается помочь и выгодно для...[...]

Анастасия

Спасибо огромнейшее за Вашу работу! Все четко, ясно, понятно и быстро! Без лишних разговоров "о судьбе отечества". Просто невероятно позитивные эмоции после общения![...]

Инна

Прекрасный врач, имеет огромный опыт, может правильно поставить диагноз, все объяснить клиенту. К каждому находит свой подход.[...]

Наталья

Спасибо от меня и всей моей семьи за профессионализм, поддержку, чуткое и внимательное отношение. Это – огромное счастье, что такие компетентные, умелые и талантливые, неравнодушные люди работают именно там, где они больше всего нужны. Ваши терпение, отзывчивость, чуткость, понимание, забота, доброжелательное и внимательное отношение, лечат и успокаивают. Желаю крепкого...[...]

Светлана

Хочу выразить огромную благодарность Чулак Ольге Александровне, за внимательность, инд. подход к пациенту, а так же профессионализм, доброжелательность и заботу! А ТАк же клинику Президент-мед и всему персоналу на ресепшн. Ольга Александровна- вы лучшая :)[...]

Светлана

Хочу выразить огромную благодарность Чулак Ольге Александровне, за внимательность, инд. подход к пациенту, а так же профессионализм, доброжелательность и заботу! А ТАк же клинику Президент-мед и всему персоналу на ресепшн. Ольга Александровна- вы лучшая :)[...]

Екатерина

Добрый день, хочу выразить свое восхищение Екатериной Викторовной, врач высшей категории, с первой секунды располагает пациента, чувствуется высокий профессионализм, очень доброжелательная, внимательная, реально всегда на связи со своими пациентами, что очень важно, так как в наше время мало кто может брать на себя ответственность. Всем советую![...]

Аромат желанной женщины притягателен для сексуального партнера, если это запах здорового тела. За его уникальный букет отвечают не только феромоны, но и... Вагинальные лактобактерии – палочки Дедерлейна

 

Знаете ли вы, что в некоторых экваториальных племенах Южной Америки много тысяч лет для мужчин существует сексуальное табу на близость с женщинами, которые, по выражению аборигенов, не пахнут здоровьем? Этот древний запрет – своеобразный залог их выживания. И его секрет кроется в палочках Дедерлейна!

 

Собирательное понятие

Сразу уточним, что «палочки Дедерлейна» – собирательное понятие, ведь речь идет об аэробных и анаэробных лактобактериях (лат. Lactobacillus – лактобациллы).

Во влагалище женщины могут обитать около 135 видов лактобатерий. Они делятся на 3 группы по доминирующей функции, поскольку некоторые разновидности палочек Дедерлейна выполняют несколько функций.

1 группа – это виды, вырабатывающие перекись водорода (L. acidophilus, L. crispatus, L. gasseri, L. johnsonii, L. vaginalis).

2 группа – виды, производящие молочную кислоту (L. salivarius, L. johnsonii, L. acidophilus, L. jensenii).

3 группа – виды, которые прикрепляются к клеткам бактерий или эпителия влагалища (L. agilis, L. jensenii, L. Johnsonii, L. ruminus).

 

Названием «лактобактерии» эти микроорганизмы обязаны
своей способности превращать лактозу (сахар) в молочную кислоту.

 

Микрофлора = 95% лактобактерий

Влагалище женщины имеет свой микробиоценоз – устойчивое сообщество микроорганизмов. В норме 1 мл вагинального секрета содержит около 110 микроорганизмов, подавляющая часть которых – лактобактерии. Они поддерживают необходимую молочную среду влагалища и препятствуют размножению патогенной микрофлоры.

Так почему же во влагалище преобладают именно палочки Дедерлейна?

 

ОСНОВНЫЕ СОСТАВЛЯЮЩИЕ НОРМАЛЬНОЙ МИКРОФЛОРЫ
ВЛАГАЛИЩА ЗДОРОВОЙ ЖЕНЩИНЫ ДЕТОРОДНОГО ВОЗРАСТА

перекисьобразующие лактобактерии – 85%
бифидумбактерии – 10%
пептострептококки – 5%

 

Питательная среда

Количество и активность лактобактерий во влагалище прямо контролируются женскими половыми гормонами – эстрогенами и прогестероном.

Эстрогены способствуют накоплению в эпителии влагалища гликогена – питательного вещества для палочек Дедерлейна.

Во второй фазе менструального цикла, когда начинает активно вырабатываться прогестерон, клетки эпителия отслаиваются, распадаются, и из них начинает высвобождаться гликоген. Это очень важный момент, ведь для лактобактерий наступает время «насыщения». А это значит, что у них хватит сил для защиты своей среды обитания – влагалища – от непрошенных «гостей».

 

Невидимые хранители

Палочки Дедерлейна – интимные «ангелы-хранители» каждой женщины.

ЛАКТОБАКТЕРИИ ПРОИЗВОДЯТ молочную кислоту, обеспечивающую во влагалище кислую среду. В норме кислотность влагалища у женщины колеблется в пределах от 3,8 до 4,5 pH. Это и есть тот самый кислотный барьер, препятствующий заселению и размножению патогенных микроорганизмов – бактерий и грибов.

ЛАКТОБАКТЕРИИ УЧАСТВУЮТ в... эволюционном отборе, ведь слабые и больные сперматозоиды погибают в кислой среде влагалища, а здоровые и крепкие – нет.

ЛАКТОБАКТЕРИИ ВЫРАБАТЫВАЮТ перекись водорода – универсальный природный антисептик, обеспечивая таким образом дополнительную защиту репродуктивных органов от патогенных микроорганизмов.

ЛАКТОБАКТЕРИИ ПРОДУЦИРУЮТ эндобиотики – вещества, действующие подобно антибиотикам. Именно палочки Дедерлейна вырабатывают, например, лизоцимы – антимикробные агенты, обладающие адгезивными («липкими») свойствами. Прилепляясь к патогенным бактериям, лизоцимы заставляют их жесткую клеточную оболочку лопаться под собственным внутренним давлением. Также лизоцимы эффективно разрушают клеточные стенки дрожжей.

ЛАКТОБАКТЕРИИ ИНИЦИИРУЮТ активность макрофагов, которые впоследствии уничтожают всевозможные патологические вещества, попавшие в организм. К примеру, макрофаги «поедают» чужие бактерии и простейших.

ЛАКТОБАКТЕРИИ УЧАСТВУЮТ в синтезе специфических антител и биологически активных веществ. Взаимодействуют они и с лейкоцитами – белыми кровяными клетками, которые служат для защиты местного и общего иммунитета в целом.

 

Норма кислотности женского влагалища – от 3,8 до 4,5 рН.
Повышенная кислотность влагалища может быть одним из симптомов
дрожжевой инфекции – вагинального кандидоза.

 

Враги палочек Дедерлейна

К нарушению баланса влагалищной микрофлоры приводит немало причин.

Неправильное питание. Чаще всего – недостаток в рационе кисломолочных продуктов, которые являются источником молочных бактерий для организма.

Несоблюдение правил гигиены. Неправильное или недостаточное проведение гигиенических процедур, пользование общим полотенцем для интимных зон, несвоевременная смена тампонов и прокладок, ношение синтетического нижнего белья, стрингов, что является настоящей «атакой» на индивидуальный микробиоценоз.

Переохлаждение организма, которое может привести к снижению общего и местного иммунитета.

Гормональные нарушения, которые приводят к изменениям клеток слизистой влагалища, что, в свою очередь, становится причиной снижения количества лактобактерий и усиленного роста патогенных возбудителей.

Инфекция. Нарушение микрофлоры влагалища способны вызвать не только инфекции, передающиеся половым пyтем, но и любые инфекционно-воспалительные заболевания органов малого таза.

Прием антибиотиков. Вместе с болезнетворными микробами антибиотики уничтожают и представителей естественной флоры влагалища, что может повлечь за собой дисбактериоз, вагинит, молочницу (кандидозный кольпит, влагалищный кандидоз) и т. п.

 

«Портрет» молочницы

Симптомы данного заболевания у каждой женщины индивидуальны – все зависит от уровня иммунитета и сопутствующих заболеваний. Но самые характерные из них: нарастающие зуд и жжение наружных половых органов, которым сопутствуют белые, творожистые выделения.

Если говорить о мужчинах, то у 50–70% из них был один эпизод данного заболевания на протяжении жизни. Признаки молочницы у представителей сильного пола не столь явные, хотя иногда их тоже беспокоит зуд и болезненность наружных половых органов, а на головке полового члена появляется белесоватая сыпь. В любом случае больному необходимо посетить уролога или венеролога.

 

Дрожжеподобные грибы рода Candida в чрезмерных концентрациях провоцируют заболевание половых органов, в просторечии именуемое молочницей. Научное название болезни – влагалищный кандидоз (по названию дрожжеподобных грибков – Candida albicans).

СИМПТОМЫ МОЛОЧНИЦЫ
– Зуд и жжение в области гениталий.
– Обильные выделения творожистой консистенции с кислым запахом.
– Боли при мочеиспускании.
– Боли во время полового акта.

 

Обратитесь к гинекологу

Если у женщины появились характерные симптомы, описанные выше, ей необходимо нанести визит гинекологу. Врач назначит бактериальный посев выделений и на основании результатов выберет соответствующую схему лечения.

Сначала нужно будет устранить причину, приведшую к размножению грибков (отменить, например, гормональные препараты или изменить рацион питания). Затем гинеколог назначит соответствующие противогрибковые препараты.

 

Даже если ничего не беспокоит.

Посещение гинеколога для каждой цивилизованной женщины — не просто визит по поводу беременности или недугов, это обязательный профилактический осмотр раз в полгода. Поводов для визита к доктору у женщин может быть много: подобрать верное средство для контрацепции, провериться на инфекции, вовремя выявить воспаление или обнаружить другие, более серьезные проблемы. Но в каждом случае визит не обходится без мазков. Для чего они нужны?  Как к ним подготовиться?

Мазок на флору или гинекологический мазок

Мазок на флору может о многом сказать. Прежде всего, определяют количество лейкоцитов. Если лейкоцитов много, то, возможно, у вас есть воспаление. Также в этом мазке определяют вид микрофлоры. Он напрямую связан с фазой менструального цикла. В анализе могут быть разные клетки палочки или кокки. Если идет воспаление, то клеток всегда будет много, так как они быстрее отторгаются. Могут появляться "ключевые клетки"-

это тоже говорит о том, что пора заняться своим здоровьем. Когда в анализах появляются гонококки или трихомонады, вот тогда вам уже точно не стоит откладывать визит к врачу. Если в вашем мазке на флору найдены нити мицелия, то это является характерным признаком кандидоза, проще говоря, "молочницы".

Перед визитом к врачу-гинекологу для сдачи анализов  следует: воздержаться  на 1-2 суток от половых контактов; не применять вагинальные препараты (крема, свечи) и не делать спринцевания в течение 2 суток; перед сдачей мазка на флору рекомендуется не мочиться в течение 2 -3  часов. Желательно сдавать мазок на флору сразу после месячных.

Мазок на "стерильность"

На приеме гинеколога у вас могут взять мазок на степень чистоты и на гормональный фон. Он определяет состав содержимого влагалища, который в норме представлен секретом, клетками эпителия и различной микрофлорой. Степень чистоты в результатах мазка выражается в цифрах: 1 и 2 являются показателями здоровья, а 3 и 4 говорят о наличии кольпита - воспаления влагалища. Существует и мазок на гормональный фон. Он показывает, как в течение менструального цикла на женский организм влияют половые гормоны - эстрогены и прогестерон. По его результатам можно установить, насколько правильно и в каком количестве они вырабатываются. Вариантом этого мазка является мазок "на угрозу "-КПИ. Он используется во время беременности для определения риска ее прерывания.

Мазок на цитологию, или Пап-тест

Мазок по Папаниколау, или Пап-тест, нужен для того, чтобы выявить отклонения со стороны клеток шейки матки. В нашей стране его еще называют мазком на атипичные клетки или на цитологию. Все это "имена" одного анализа. Мазок по Папаниколау не следует брать  во время менструации, а также при наличии воспаления, так как полученный результат может оказаться ложным. В течение суток, как и при заборе мазка на флору, следует избегать интимной близости, не использовать свечи или тампоны. В цитологическом мазке оцениваются размеры, форма, количество и характер расположения клеток. У молодых девушек по этому анализу можно оценить правильность выработки эстрогенов. Мазок считается нормальным или отрицательным, когда все клетки имеют нормальные размеры и форму, и соответствуют месту забора, отсутствуют атипичные клетки.  При выявлении атипичных клеток необходима консультация онколога. Аномальный мазок не всегда означает, что у женщины есть онкологическое заболевание шейки матки. При воспалении клетки тоже могут выглядеть аномальными. Но после лечения мазок обычно становится нормальным.

Мазок на скрытые инфекции

Эти мазки служат для выявления инфекций, которые не определяются при исследовании на флору. К ним относятся хламидии, уреаплазма, микоплазма , генетальный герпес, папилломавирусная и цитомегаловирусная инфекции. Есть достаточно большое количество различных методов диагностики таких инфекций. Наиболее достоверным является метод ПЦР - полимеразная цепная реакция, при котором инфекцию определяют по ее ДНК.

Забор мазков у женщин проводится по возможности в период вне месячных. Не рекомендуется использование спринцевания, а также любых вагинальных средств: свечей, овулей, следует воздерживаться от приема антибактериальных препаратов (антибиотиков и антисептиков) как внутрь, так и в виде местных инстилляций, а половой контакт за 24 часа до проведения исследования.  

Посев на флору с определением чувствительности к антибиотикам

Существует два основных типа исследования посева на флору и чувствительность к антибиотикам:

  • посев на флору с определением чувствительности к основному спектру антибиотиков,
  • посев на флору с определением чувствительности к расширенному спектру антибиотиков.

Посев на флору с определением чувствительности позволяет установить возбудитель заболевания, а также подобрать наиболее целесообразный антибиотик. Это скорректирует выбранный терапевтический курс, а также, возможно, выявит причину неэффективности предыдущего курса лечения.

Ульянова Сания Музагитовна - акушер-гинеколог, врач высшей категории, главный врач медицинского центра «Тет-а-тет».

 

Гинекологический мазок на флору - Клиника Здоровье 365 г. Екатеринбург

Гинекологический мазок – простой и быстрый  лабораторный метод исследования нормальной и патогенной флоры под микроскопом. Для информативности мазков, перед посещением врача женщина не должна проводить санации влагалища, пользоваться вагинальными препаратами и иметь половые контакты (в течение 48 часов), т.к. все перечисленное может изменить микроскопическую картину. Забор осуществляется врачом-гинекологом одноразовым шпателем из трех точек – из наружного отверстия уретры ("U"), влагалища ("V") и шейки матки ("C"). Взятый материал распределяется на предметное стекло, высушивается и направляется в лабораторию на микроскопию. Разные части клеток и бактерии окрашиваются в разные цвета, что позволяет оценить состав выделений из уретры, влагалища и шейки матки.

 

 

В данном мазке могут быть обнаружены:  

 

 

Плоский эпителий

– слой клеток, выстилающий влагалище и шейку матки. В норме эпителий должен присутствовать. Отсутствие его в мазке свидетельствует об атрофии эпителиальных клеток.

 

Лейкоциты

– норма до 15 единиц в поле зрения (в мочеиспускательном канале до 5, во влагалище до 10 и в шейке матки до 15 единиц в поле зрения). Количество лейкоцитов в мазке резко возрастает при воспалении влагалища (кольпит, вагинит). Чем больше лейкоцитов, тем острее протекает заболевание.   При остром воспалении значение этого показателя будет "до 100 в поле зрения" или "покрывают все поле зрения".

 

Палочки

в мазке составляют нормальную микрофлору влагалища. Кроме палочек в мазке не должно быть других микроорганизмов.

 

«Ключевые» клетки

в мазке - это гарднереллы – возбудители гарднереллеза. Дрожжевые грибы – признак кандидоза (молочницы). В скрытых (бессимптомных) стадиях молочницы грибок в мазке может обнаруживаться в виде спор.

 

Лептотрикс (Leptothrix) - анаэробная грамотрицательная бактерия. Чаще всего лептотрикс встречается при смешанных половых инфекциях  -  трихомониазе и хламидиозе, при кандидозе и бактериальном вагинозе. Определение его в мазке должно настораживать врача и предусматривать дальнейшее более углубленное обследование.

 

 

Мобилункус анаэробный микроорганизм, один из представителей транзиторной микрофлоры мочеполовых органов. Часто встречается у женщин с бактериальным вагинозом и кандидозом.

 

 

Трихомонада – простейший микроорганизм, представляет собой подвижный одноклеточный организм со жгутиком, вызывающий воспалительные заболевания мочеполовой сферы.

 

 

Гонококки (диплококки) – возбудители гонореи - в мазке норме не определяются.

 

Мазок на степень чистоты | Клинико-диагностические лаборатории "ОЛИМП"

Мазок – это метод обследования, при котором исследуемый материал берется с поверхности слизистой оболочки. Целью анализа является оценка состава микрофлоры и выявления воспалительных заболеваний.

Забор производится с трех участков: с мочеиспускательного канала, с влагалища и шейки матки. Материал с данных участков обозначается на предметном стекле буквами «U», «V»  и «C» соответственно.

В половые органы женщины заселены нормальной флорой – микроорганизмами, не приносящие  вреда организму, кроме того, они способствуют задержке развития условно-патогенных микробов, которые становятся причиной воспаления при определенных условиях (не относятся к половым инфекциям). Самой полезной флорой является палочка Дедерлейна (лактобацилла), помогающая «очищать» половые органы от различных возбудителей. Определение качественного и количественного взаимоотношения флоры – является важным этапом в постановке диагноза и определения тактики лечения.

Оценка стояния естественной флоры имеет в своей классификации четыре степень чистоты влагалища:

1 степень – в мазке эпителиальные клетки и нормальное количество лактобацилл, рН – кислая;

2 степень – небольшое количество лейкоцитов, лактобацилл меньше, присутствуют грамположительные диплококки. рН – остается кислой;

3 степень – повышенное количество клеток эпителия и лейкоцитов, снижение лактобацилл, множество кокковых бактерий, рН – слабокислая или щелочная;

4 степень – в большом количестве эпителий и лейкоциты, гноеродные микроорганизмы, отсутствие лактобацилл, рН – щелочная.

Что может быть обнаружено в мазке:

Лейкоциты – небольшое количество обнаруживается в норме, так как эти клетки необходимы для защиты организма от микробов. Лейкоциты свыше нормы - признак воспалительного процесса.

Эпителий - также в небольшом количестве присутствует в биоматериале. Его отсутствие свидетельствует о гормональном дисбалансе у женщины: дефицит женских эстрогенов, избыток мужского тестостерона. Эпителий в большом количестве – один из признаков воспалительного процесса. Количество также зависит от фазы менструального цикла.

Слизь – продуцируется железами влагалища,  обнаружение слизи в уретре  говорит о воспалении в мочевыводящих путях.

Эритроциты – красные кровяные тельца, могут присутствовать в зависимости от фазы менструального цикла.  Если их число превышает допустимую нормы, то предполагается травматизация слизистой влагалища, эррозивные процессы или воспаление.

Микрофлора – преобладание тех или иных неидентифицированных микроорганизмов: кокки, палочки…

Атипичные клетки -   свидетельствуют о предраковом состоянии.

Ключевые клетки -  клетки эпителия, «склеенные» гарднереллами или другими микробами. Подобные клетки наблюдаются при снижении иммунитета, при гарднереллезе.

Гарднереллы - мелкие бациллы в мазке. В норме могут присутствовать в небольшом количестве. Повышенное количество (при дисбактериозе влагалища) этих бактерий приводит к бактериальному вагинозу.

Кандида -  грибок, как и гарднереллы, присутствует в небольшом количестве у здоровых женщин. Если лактобактерий становится меньше, чем кандид, то развивается вагинальный кандидоз (в народе— «молочница»). Основная причина  увеличения кандид - снижение иммунитета, в том числе при беременности, или при приеме антибиотиков.

Кокки - шарообразные бактерии, которые бывают как условно-патогенными (стафилококк), так и патогенными (гонококк).

Гонококк – возбудитель гонореи. Может поражать не только влагалище, но и мочеиспускательный канал, маточные трубы и прямую кишку. Относятся к половой инфекции

Стафилококк - при благоприятных для него условиях (снижение иммунитета) вызывает стойкое воспаление.

Стрептококк -  бактерия, которая обитает в небольшом количестве в желудочно-кишечном тракте, в дыхательных путях, а также в полости рта и носа. В единичном количестве стрептококки в мазке расцениваются как норма. Увеличение концентрации стрептококка приводит к неспецифическому воспалению

Энтерококк – естественный обитатель микрофлоры ЖКТ. Энтерококк в большом количестве указывает на воспаления мочеполовой системы или органов малого таза.

Проблема заключается в том, что этим микроорганизмам не всегда уделяется должное внимание и лечится только половая инфекция, в то время как у стафилококков, стрептококков и энтерококков  развивается устойчивость к антибиотикам. КДЛ «ОЛИМП» рекомендует при обнаружении подобной микрофлоры выполнять анализ «бакпосев соскоба из влагалища с определением чувствительности к антибиотикам», который позволяет подобрать оптимальное медикаментозное лечение.

Трихомонада.  Мазок на инфекции не всегда выявляет трихомонаду, так как эта бактерия может иметь измененные формы. Чтобы подтвердить ее наличие, делают бактериологический посев.

Мазок на степень чистоты гинекологический, подготовка к процедуре и цена мазка в Самаре

Мазок является методом обследования, где исследуемый материал забирается с поверхности слизистой оболочки. Цель проведения данного анализа — это оценка микрофлоры и выявление наличия воспалительных процессов.  

Забор может производиться: 
  1. с шейки матки; 

  2. с мочеиспускательного канала; 

  3. с влагалища. 

Полученный материал отправляется в лабораторию, где проводится исследование состава. Нормальная микрофлора содержит микроорганизмы, которые не только не приносят вреда, но и сдерживают развитие воспалительных процессов. 

Определение состояния флоры является наиболее важным элементом на этапе диагностики и выбора дальнейшего лечения. 

Оценка стояния флоры имеет четыре различные степени чистоты: 
  • 1 степень – рН – кислая, количество лактобацилл в норме; 

  • 2 степень – присутствуют грамположительные диплококки, при этом количество лейкоцитов небольшое, рН – кислая; 

  • 3 степень – количество клеток эпителия и лейкоцитов повышенно, количество лактобацилл ниже среднего уровня, присутствие кокковых бактерий, рН – слабокислая или щелочная; 

  • 4 степень – количество эпителий и лейкоцитов сильно превышает норму, присутствуют гноеродные микроорганизмы,количество лактобацилл крайне низкое, рН – щелочная.

 

Что может быть обнаружено в мазке: 

Лейкоциты — клетки, которые служат для защиты организма от микробов. Количество лейкоцитов выше положенной нормы является признаком воспалительного процесса. 

Атипичные клетки могут сигнализировать о предраковом состоянии. 

Эпителий. Отсутствие эпителия говорит о гормональном дисбалансе в организме. Если эпителий обнаружен в слишком высоком количестве (с учётом менструальной фазы), то это может сигнализировать о воспалительном процессе.  

Слизь. Если в уретре обнаружена слизь, то это также может сигнализировать о воспалении в мочевыводящих путях. 

Эритроциты – это красные кровяные тельца. В случае, когда их число выше нормы, можно говорить как о воспалительных процессах, так и о возможных травмах. 

Микрофлора показывает наличие и баланс различных микроорганизмов. 

Ключевые клетки. Данное явление часто встречается при сниженном иммунитете и гарднереллезе. 

Гарднереллы (бациллы). Высокое количество данных бактерий может закончится бактериальным вагинозом. 

Кандида. Грибок, который присутствует в некотором количестве в здоровом организме. Но если число кандид превышает количество лактобактерий, возможно развитие вагинального кандидоза («молочница»). Причиной может послужить снижение иммунитета на фоне приёма антибиотиков, при беременности или общем ослаблении организма. 

Кокки. Данные бактерии, могут вызывать стафилококк(сопровождается воспалением) или гонококк (гонорея — инфекция поражающая половые органы). 

Стрептококк - бактерия, увеличение её количества выше нормы приводит к воспалению. 

Энтерококк – присутствует в микрофлоре ЖКТ. В большом количестве энтерококк указывает на воспаление протекающее в органах мочеполовой системы или малого таза. 

Трихомонада. Наиболее точно наличие этой бактерии позволяет определить процедура бактериологического посева.

 

Перечисленным микроорганизмам не всегда уделяют необходимое внимание при лечении инфекции, в то время, как это является залогом здорового организма в будущем. Поэтому клиника «Нью Лайф» использует самые современные методы исследования бактериологического состава, чтобы наиболее точно определить диагноз и курс последующего лечения.

ФЕКАЛЬНОЕ МИКРОСКОПИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ** | Пособия для студенческого оздоровительного центра

P urpose и Scope:

Микроскопическое исследование может использоваться для определения наличия лейкоцитов и эритроцитов в мазке кала. Это очень быстро предоставит врачу информацию о болезненном состоянии пациента. Определение наличия лейкоцитов может быть полезно при первоначальном обследовании пациентов с диареей, возможно, из-за бактериальной инфекции.

Реагенты и расходные материалы:

Набор для окрашивания по грамму (Hardy Diagnostics)

Реагент Кристально-фиолетовый

Реагент стабилизированный йод

Обесцвечивающее средство на основе 50% ацетона и спирта

0,4% Сафранин

Краска для одного шага Райта

Дистиллированная вода

Предметные стекла для микроскопа

Микроскоп с масляной иммерсионной линзой

Промокательная бумага

Нагревательный блок

Хранение реагентов:

  • Хранить набор для окрашивания по Граму при комнатной температуре.
  • Не использовать по истечении срока годности набора

Контроль качества:

См. Контроль качества процедуры окрашивания по Граму (СОП Micro-02)

Процедура

Процедура окрашивания по Граму:

  1. Нанесите образец стула на чистое предметное стекло микроскопа с помощью палочки-аппликатора, чтобы получить тонкий однородный мазок.
  2. Дать высохнуть на воздухе.
  3. Покровное стекло с кристально-фиолетовым реагентом на 1 минуту.Осторожно промойте водопроводной водой и дайте стечь.
  4. Покровное стекло с йодным реагентом на 1 минуту. Осторожно промойте водопроводной водой и дайте стечь.
  5. Промойте предметное стекло Обесцвечивателем, пока оно не потечет без цвета. Не перекрашивайте. Осторожно промойте водопроводной водой и дайте стечь,
  6. Покровное стекло с Safranin Counterstain на 30-60 секунд. Осторожно промойте водопроводной водой и дайте стечь. Поместите слайд между листами промокательной бумаги, чтобы он высох.
  7. Нанесите небольшую каплю масла на окрашенный образец и исследуйте предметное стекло под масляной иммерсионной линзой.

Процедура влажной установки :

  1. Нанесите образец стула на чистое предметное стекло с помощью палочки-аппликатора, добавьте 1 или 2 капли физиологического раствора и тщательно эмульгируйте.
  2. Крепление с покровным стеклом. Удовлетворительный препарат должен иметь слегка непрозрачную плотность, но быть достаточно тонким, чтобы газетный оттиск можно было сквозь него разобрать.
  3. Изучите предметное стекло, методично сканируя каждое поле всего покровного стекла с помощью 10-кратного объектива, переходя в режим высокой влажности (40-кратный) для более тщательного изучения подозрительных объектов.

Процедура окрашивания Райтса

  1. Нанесите образец стула на чистое предметное стекло микроскопа с помощью палочки-аппликатора, чтобы получить тонкий однородный мазок.
  2. Дать высохнуть на воздухе.
  3. Используя одноразовую пипетку, покройте предметное стекло пятном Райта и дайте постоять примерно 20 секунд.
  4. Промыть дистиллированной водой.
  5. Наклоните и высушите на воздухе до полного высыхания.
  6. Осмотрите предметное стекло под маслом, используя масляную линзу 100X.

Устный перевод:

О наличии (или отсутствии) лейкоцитов и эритроцитов сообщать как:

  • Лейкоцитов (или лейкоцитов) или эритроцитов (или красных кровяных телец) не обнаружено
  • Редкие: 1-5 замечено всего
  • Occ (1+):> 5 просмотрено, <1 / HPF
  • Мало (2+): 1/4 поля
  • Mod (3+): 1/2 поля
  • Многие (4+):> 1/2 поля

При исследовании мазка кала ищите «долю» лейкоцитов, поскольку стул содержит частицы пищи и мусор, которые могут напоминать лейкоциты.

Также сообщите о наличии аномальной флоры, включая дрожжевые грибки.

При исследовании мазка кала ищите «долю» лейкоцитов, поскольку стул содержит частицы пищи и мусор, которые могут напоминать лейкоциты.

Также сообщите о наличии аномальной флоры, включая дрожжи.

ССЫЛКИ

Бейли и Скотт, Диагностическая микробиология, 4-е издание, 1974 г., C.V. Мосби, Сент-Луис, стр. 392 - 393.

Вставка продукта, Hardy Diagnostics, Санта-Мария, Калифорния.

Наблюдатель медицинской лаборатории, сентябрь 1995 г., «Советы клинических экспертов; Фекальные лейкоциты »

Тодд, Сэнфорд и Дэвидсон, Клиническая диагностика и лечение с помощью лабораторных методов, 17-е издание, 1984 г., W. B. Saunders Company, Филадельфия, стр. 1212 - 1213.

5. Миллер Дж. Р., Барретт Л. Дж., Котлофф К., Геррант Р. Л.. Экспресс-тест на инфекционно-воспалительный энтерит. Arch Intern Med. 1994; 154: 2660-2664.

3.1. Введение - Biology LibreTexts

Цели обучения

  • Узнайте о различиях между методами простого и дифференциального окрашивания.
  • Узнайте, как приготовить бактериальный мазок из культивируемых организмов.
  • Узнайте о различиях между грамположительными и грамотрицательными бактериями.
  • Узнайте, как выполнять процедуру окрашивания по Граму.
  • Используйте микроскопию для исследования окрашенных по Граму клеток.
  • Узнайте о некоторых специальных процедурах окрашивания и просмотрите их примеры под масляной иммерсией.

Большинство типов клеток не имеют большого количества естественного пигмента, поэтому их трудно увидеть под световым микроскопом, если они не окрашены. Чтобы сделать бактериальные клетки более заметными, используются несколько типов красителей. Кроме того, можно использовать специальные методы окрашивания для определения биохимических или структурных свойств клеток, таких как тип клеточной стенки и наличие или отсутствие эндоспор. Этот тип информации может помочь ученым идентифицировать и классифицировать микроорганизмы, а также может использоваться поставщиками медицинских услуг для диагностики причины бактериальной инфекции.

Одним из типов процедуры окрашивания, который можно использовать, является простое пятно , в котором используется только одно пятно, и все типы бактерий выглядят как цвет этого пятна при просмотре под микроскопом. Некоторые пятна, обычно используемые для простого окрашивания, включают кристаллический фиолетовый, сафранин и метиленовый синий. Простые красители можно использовать для определения морфологии и расположения бактерий, но они не дают никакой дополнительной информации.

Ученые часто предпочитают проводить дифференциальное окрашивание , поскольку это позволяет им собрать дополнительную информацию о бактериях, с которыми они работают.В дифференциальных красителях используется более одного красителя, и клетки будут иметь разный вид в зависимости от их химических или структурных свойств. Некоторыми примерами дифференциальных красителей являются окраска по Граму, кислотостойкая окраска и окраска на эндоспоры. В этой лаборатории вы узнаете, как подготовить бактериальные клетки к окрашиванию, и узнаете о технике окрашивания по Граму.

Пятно по Граму

Эта очень часто используемая процедура окрашивания была впервые разработана датским бактериологом Гансом Кристианом Грамом в 1882 году (опубликована в 1884 году) при работе с образцами тканей легких пациентов, умерших от пневмонии.С тех пор процедура окрашивания по Граму широко используется микробиологами во всем мире для получения важной информации о видах бактерий, с которыми они работают. Знание реакции по Граму клинического изолята может помочь медицинскому работнику поставить диагноз и выбрать подходящий антибиотик для лечения.

Результаты окрашивания по Граму

отражают различия в составе клеточной стенки. Грамположительные клетки имеют толстые слои пептидогликана (углевода) в клеточных стенках; Грамотрицательные бактерии имеют очень мало.Грамположительные бактерии также содержат тейхоевую кислоту, а грамотрицательные - нет. Грамотрицательные клетки имеют внешнюю мембрану, которая напоминает бислой фосфолипидов клеточной мембраны. Наружная мембрана содержит липополисахариды (ЛПС), которые выделяются в виде эндотоксинов при гибели грамотрицательных клеток. Это может беспокоить человека с инфекцией, вызванной грамотрицательным организмом.

На рис. 3.1.1 показаны основные различия между грамположительными и грамотрицательными клеточными стенками (также обратитесь к вашему учебнику за дополнительной информацией).Различия в составе клеточной стенки отражаются в том, как клетки реагируют с красителями, используемыми в процедуре окрашивания по Граму.

Окрашивание по Граму

лучше всего проводить на свежих культурах - более старые клетки могут иметь поврежденные клеточные стенки и не давать правильной реакции по Граму. Кроме того, некоторые виды известны как с грамм-переменной , поэтому на вашем слайде могут быть видны как грамположительные, так и грамотрицательные реакции.

Хотя подавляющее большинство бактерий являются грамположительными или грамотрицательными, важно помнить, что не все бактерии могут быть окрашены с помощью этой процедуры (например, микоплазмы, у которых нет клеточной стенки, плохо окрашиваются красителем по Граму).

Рисунок 3.1.1: грамположительных и грамотрицательных клеточных стенок

специальных красителей

Существует множество процедур окрашивания, используемых для идентификации определенных внешних или внутренних структур, которые не обнаруживаются у всех видов бактерий (см. Таблицу в конце этого упражнения для сравнения процедур окрашивания). Некоторые из этих процедур окрашивания вы проделаете в следующей лаборатории (кислотостойкое окрашивание и окрашивание эндоспор). В сегодняшней лаборатории вы увидите подготовленные слайды со специальными красителями: окраска капсулы ( Klebsiella pneumoniae ), окраска жгутиков ( Proteus vulgaris, ) и окраска спирохет ( Treponema pallidum ).

Капсульное пятно

Некоторые бактерии выделяют богатую полисахаридами структуру вне клеточной стенки, называемую гликокаликсом. Если гликокаликс тонкий и неплотно прикрепленный, его называют слоем слизи; если она толстая и плотно прилегает к клетке, ее называют капсулой . Гликокаликс может защищать клетку от высыхания и позволяет клетке прилипать к поверхностям, таким как ткани в организме. Они также могут обеспечивать клетки защитой от обнаружения и фагоцитоза иммунными клетками и способствовать образованию биопленки: таким образом, гликокаликс может действовать как фактор вирулентности; (способствует способности организма вызывать болезнь).

Капсулы могут быть обнаружены с использованием процедуры отрицательного окрашивания , при которой фон (слайд) и бактерии окрашиваются, но капсула не окрашивается. Капсула выглядит как чистая неокрашенная зона вокруг бактериальной клетки. Поскольку капсулы разрушаются при нагревании, процедура окрашивания капсулы выполняется без термической фиксации бактерий.

Серебряное пятно

Жгутики (длинные шиповидные структуры, используемые для подвижности бактерий) и некоторые бактерии (например,грамм. спирохет ) слишком тонкие, чтобы их можно было наблюдать при регулярных процедурах окрашивания. В этих случаях используется морилка . Нитрат серебра применяется к бактериям вместе со специальной протравой; нитрат серебра осаждается вокруг жгутиков или тонких бактерий, утолщая их, чтобы их можно было наблюдать под световым микроскопом.

Ключевые термины

Окрашивание по Граму, бактериальный мазок, простое окрашивание, дифференциальное окрашивание, грамположительный, грамотрицательный, переменный по Граму, капсула, спирохеты, жгутики, отрицательное окрашивание, окрашивание серебром

Corynebacterium diphtheriae - обзор

Естественная история, патогенез и патология

Corynebacterium diphtheriae - грамположительная, тонкая, неподвижная, не спорулирующая палочка. На основании морфологии и биохимических характеристик колонии выделяют четыре биотипа C. diphtheriae (gravis, mitis, intermediate и belfanti). Некоторые штаммы производят мощный экзотоксин дифтерии. Прежде чем C. diphtheriae станет токсигенным, он должен быть лизогенизирован определенным бактериофагом. Коринебактериофаг несет структурный ген токсина ( tox ). Токсин-продуцирующие штаммы всех биотипов продуцируют идентичный дифтерийный экзотоксин [1]. Между биотипами не было продемонстрировано стойких различий в патогенности или тяжести заболевания.Токсигенные штаммы C. diphtheriae не являются инвазивными, но вызывают у восприимчивых людей локализованное токсин-опосредованное заболевание, колонизируя слизистую оболочку верхних дыхательных путей или кожные раны и язвы. Редко могут быть инфицированы другие участки слизистой оболочки, например конъюнктива, ухо и влагалище. После вдыхания микроорганизмы размножаются в месте колонизации и вызывают воспалительную реакцию в слизистой оболочке носоглотки, ротоглотки, гортани или трахеи. Воспаление характеризуется выраженной нейтрофильной инфильтрацией, закупоркой сосудов и интерстициальным отеком.Лизогенизированные организмы продуцируют дифтерийный токсин, который подавляет внутриклеточный синтез белка и вызывает локальный эпителиальный некроз с густым фибринозно-гнойным экссудацией. Некротический мусор, экссудат, белые и красные кровяные тельца, фибрин и бактерии коагулируют, образуя грязно-серую и прилипшую псевдомембрану над слизистой оболочкой. Расширение псевдомембраны может привести к опасной для жизни обструкции дыхательных путей. Попытки удалить псевдомембрану обычно приводят к кровотечению на месте. При лечении или контроле инфекции мембрана может отслоиться от ложа слизистой оболочки сосудов и привести к кровотечению и удушью, или она может отхаркиваться.Токсин дифтерии может всасываться из очага инфекции в кровоток и переноситься в отдаленные места. Системная абсорбция увеличивается с расширением локального воспалительного процесса и увеличением псевдомембраны. В отсутствие циркулирующих нейтрализующих антител к дифтерийному токсину может происходить обширное опосредованное токсином повреждение органов-мишеней, особенно в сердце и периферической нервной ткани. Поражение миокарда проявляется миокардитом, который характеризуется отеком, инфильтрацией мононуклеарных клеток и жировыми изменениями, а также очаговым некрозом миокарда и его проводящей системы.Полинейропатия возникает в результате дегенерации миелиновой оболочки и осевого цилиндра черепных или периферических нервов. Иногда острый некроз канальцев почек может приводить к почечной недостаточности [4, 5].

Инфекция, вызванная нетоксигенным C. diphtheriae , может быть связана с болью в горле без образования псевдомембран, но с инвазивным заболеванием. Бактериемия, эндокардит, аневризмы, остеомиелит и септический артрит были зарегистрированы среди групп наркоманов, алкоголиков, бездомных и австралийских аборигенов.

Дифференциальные окрашивания для идентификации бактерий: по Граму, кислотоустойчивые и эндоспорые

Грамм, кислотоустойчивые и эндоспорные бактериальные пятна - P2

Цильское первичное окрашивание карболфуксином , наносится на предметное стекло бактериального мазка, покрытое промокательной бумагой, на водяной бане.

Кислотно-быстрое окрашивание

Во время кислотостойкого окрашивания кусок промокательной бумаги в форме слайда помещается поверх бактериального мазка, затем на промокательную бумагу наносится ярко-розовый краситель (карболфуксин Циля). слайд и бумагу помещают на водяную баню (паровой горшок с водой, закрытый сеткой) на 3-5 минут.

Страница последнее обновление 3/2016

Фотошаблоны для дифференциальных пятен

уже в продаже!

PAGE 2 < На страницу 1

Продолжение ...

эндоспоровой Stain

Виртуальный Микробиология Класс предоставляет широкий спектр бесплатных образовательных ресурсов, включая PowerPoint Лекции, Исследование Руководства , Обзорные вопросы и практические тестовые вопросы.

SPO VIDEO :

Как сделать кислотостойкое пятно

Что кислотоустойчивое пятно показывает о бактериях как окраска по Цилю Нильсену, используется для идентификации специализированных бактерий, у которых есть восковая миколиновая кислота в их клеточной стенке. Миколиновая кислота присутствует в бактериях редко, только у двух родов: Mycobacteria

и Nocardia .Бактерии, содержащие миколиновую кислоту, считаются «кислотоустойчивыми», тогда как подавляющее большинство бактерий, не имеющих клеточных стенок, содержащих миколиновую кислоту, считаются «некислотостойкими».

ЗАМЕТКИ КЛАССА

с бесплатного сайта STEM

образовательного сайта

Восковые кислотостойкие клетки окрашиваются в ярко-розовый цвет и слипаются, слипаясь. Невоскообразное (не кислотоустойчивое) пятно темно-пурпурного цвета. Бактерии просматриваются при 1000xTM.

После завершения этого шага промокательная бумага выбрасывается, а предметное стекло ополаскивается.Затем применяется обесцвечивающее средство, кислотный спирт, чтобы удалить пятно с некислотных быстрых клеток. Наконец, наносится контркрашивание пурпурного цвета (кристаллический фиолетовый) и предметное стекло ополаскивается.

После этой процедуры окрашивания кислотоустойчивые (восковидные) бактериальные клетки становятся ярко-розовыми, а некислотные (не восковидные) бактериальные клетки - пурпурно-синими.

В этой статье

3 страницы:

Окрашенный мазок - Footrot @ Sydney

Пораженный материал, нанесенный на предметное стекло, закрепленный нагреванием, окрашенный по методу Грама и исследованный с помощью световой микроскопии, обычно содержит D. nodosus , которые имеют характерную морфологию: крупные грамотрицательные бациллы с параллельными сторонами (длина 3-10 мкм и ширина 0,6-0,8 мкм), часто с концевыми увеличениями (ширина 0,8-1,2 мкм), обычно поодиночке, но иногда в виде пар, соединенных концом к конец (Беверидж, 1941). Во флоре обычно преобладают другие виды, включая F. necrophorum , коккобациллы, диптероиды и спирохеты, некоторые из которых могут скапливаться вокруг изолированных D. nodosus , явление, известное как сателлитизм (Beveridge, 1941).

Рис. 1. Образец экссудата берут из стыка кожа-рог межпальцевого воспалительного поражения (оценка 1 или 2) с помощью ватного тампона. Фотография: «Ричард Уиттингтон,

».

Рис. 2. Образец экссудата берут с переднего края высыпания (оценка 3 или 4) с помощью тампона. Мазок можно использовать для мазка на предметном стекле, засеять культуральный планшет, поместить в транспортную среду для последующего культивирования или исследовать непосредственно с помощью ПЦР.Фотография: `` Джон Эгертон

''.

Рис. 3. Образец поражения наносят на предметное стекло, сушат и окрашивают. Тот же тампон можно использовать для инокуляции культурального планшета или поместить в транспортную среду для последующего культивирования, или исследовать непосредственно с помощью ПЦР. Фотография: `` Джон Эгертон

''.

Рисунок 4. Мазок образца поражения на предметном стекле из случая гнили стопы, окрашенный по Граму. Присутствует смесь грамположительных (черный) и грамотрицательных (красный) бактерий. D. nodosus легко распознается как самая крупная палочковидная бактерия на изображении (синие стрелки). Фотография: «Ричард Уиттингтон,

».

Рис. 5. Чистая культура D. nodosus . Окраска по Граму. Фотография: «Ричард Уиттингтон,

».

Вернуться на: Введение в лабораторное подтверждение

Как это:

Like Loading ...

Микроскопия мокроты - посев, окрашивание, требования и наблюдения

Посев, окрашивание, требования и наблюдения

По сути, мокрота состоит из смеси слюна и слизь.Также называемая мокротой, мокрота вырабатывается в бронхах. и бронхиол дыхательной системы и кашель снизу дыхательных путей и не следует путать или принимать за слюну, которая выделяется во рту для пищеварения.

Тоже не надо путать со слизью, учитывая, что мокрота вырабатывается только в частях дыхательных путей (например, бронхиолы). Он может различаться по цвету и вязкости. от толстого до тонкого или от прозрачного до темно-желтого цвета. Все это во многом зависит о его содержании.Например, также могут присутствовать клетки крови или деготь. как бактерии.

Микроскопия мокроты используется для определения любые основные проблемы со здоровьем для лечения.


Микроскопия мокроты

Относится к микроскопическому исследованию. исследование мокроты. Было показано, что это один из самых эффективных методы выявления туберкулезной инфекции среди пациентов с целью оказания помощи им начинают лечение.

Для микроскопии мокрота может быть приготовлена ​​непосредственно после сбора или культивирования перед микроскопией.


Культивирование мокроты

Культивирование просто включает стимулирование роста микроорганизмов в мокроте. Мокрота может содержать определенные типы бактерий или грибков.

При использовании метода культивирования эти микроорганизмы могут расти в благоприятных условиях, при достаточном питании, оптимальной температуре и влажности и т. Д., Что упрощает их идентификацию.

Для посева мокроты не рекомендуется использовать жидкость для полоскания рта среди других лекарственных веществ, используемых для полоскания рта.Это связано с тем, что они могут содержать различные антибактериальные вещества, которые могут негативно повлиять на конечный результат.

Образец получают либо путем кашля (откашливания) рано утром перед питьем или едой.

В зависимости от подозреваемого типа микроорганизма ниже приведены некоторые из питательных сред, используемых в мокроте. посев:

  • Кровяной агар
  • Цистеин Дефицит лактозы-электролита
  • Шоколадный агар

Селективная среда для:

* Когда микроорганизм начинает расти, он идентифицировали с помощью микроскопа.

Что касается микроскопии, светлого поля и флуоресцентные микроскопы можно использовать для наблюдения и изучения внешнего вида кислотно-фактических бацилл. Также можно использовать метод окраски по Граму для с целью обнаружения присутствия грибов.


Светлопольный микроскоп - это самый простой способ освещения микроскопа по сравнению с составными микроскопами.

Для этого метода в составном микроскопе не требуются какие-либо специальные дополнительные аксессуары, что означает, что пользователь будет рассматривать образец как более темный объект, окруженный светлым полем (фоном).


Метод Циля-Нильсена (кислотостойкое окрашивание бацилл)

Метод окрашивания Циля-Нильсена является кислотостойким метод окрашивания, используемый для определения присутствия кислых бактерий, таких как виды Mycobacterium. Для этого используется светлопольная микроскопия. техника.

Чтобы определить, есть ли у пациента туберкулез, используется микроскопия мокроты. обнаружить присутствие микобактерий туберкулеза, то есть бактерий, которые вызывает туберкулез.

Требования

  • Светлый полевой состав микроскоп
  • Стойка для окрашивания
  • Палочка для обжига
  • Пинцет
  • Стойка для предметных стекол
  • Вода / дистиллированная вода
  • 25-процентная серная кислота
  • Carbol Fuchsin
  • Метиленовый синий / малахит зеленый
  • Образец
  • Стекло микроскопа слайд / покровное стекло

Процедура

* Обязательно используйте перчатки при работе биологические жидкости, такие как мокрота.

  • Осторожно откройте контейнер (содержащий образец мокроты) и с помощью лабораторного сжигания палочку (сухую) получить и нанести небольшое количество на центральную часть предметное стекло микроскопа - используйте вращательное движение для создания хорошего мазка
  • Поместите предметное стекло на сушильную стойку и дайте высохнуть около 30 минут или используйте сушилку, чтобы высушить мазок. быстрее
  • Пропустите слайд по Бунзену пламя горелки 3–4 раза, чтобы зафиксировать нагрев, избегая перегрева
  • Поместите задвижку на стойку для окрашивания и вылейте пятно Carbol fuschin (чтобы покрыть мазок) и нагрейте пока он не начнет испаряться - не перегревать
  • Дать слайду постоять в течение 4-7 минут, затем промойте водой по желанию
  • Залейте 20-процентный сульфид кислоты на мазок и дайте ему постоять минуту.Повторяйте это до тех пор, пока мазок имеет розовый цвет
  • Промойте предметное стекло водой и покройте предметное стекло малахитовым зеленым пятном или метиленовым синим и позвольте слайд стоять примерно 2 минуты
  • Промыть слайд водой и дайте слайду высохнуть на решетке для сушки / сушки - используйте салфетку, чтобы убрать слайды и заднюю часть слайда
  • Посмотрите слайд под микроскоп с иммерсионным объективом 100x


Наблюдение

Если в образце присутствуют бактерии, ученики увидят розовые стержни, которые прямые или слегка изогнутые, пока фон станет голубоватым - розовые палочки - это бактерии.

Примечания

Кислотостойкие бактерии, такие как микобактерии, имеют липоидная капсула, придающая клеточным стенкам восковой вид. Их клеточные стенки также содержат большое количество миколиновой кислоты и жирных кислот. Благодаря этим соединения в клеточной стенке, кислотоустойчивые бактерии требуют специальной техники Что касаемо окрашивания.

Во время окрашивания основное пятно способно проникают в клеточную стенку кислотоустойчивых бактерий, потому что пятно жирорастворимый.Нагрев также усиливает это. Когда используется обесцвечивающее средство (сульфуловая кислота) кислотоустойчивые бактерии сохраняют первичное пятно, в то время как некислотные быстро теряет пятно.

Кислотоустойчивые бактерии способны удерживать первичное окрашивание из-за характеристик их клеточной стенки. Когда используется противокраситель, он легко усваивается некислотными микроорганизмами, но не кислотоустойчивые бактерии.


Флуоресцентный микроскоп - это составной микроскоп, в котором для наблюдения за объектом применяется флуоресценция и фосфоресценция.При использовании этого метода микроскопии исследуемый образец является источником света. Этот метод также важен для микроскопии мокроты.

Метод аурамина-родамина

Также называется методом окрашивания Truant, Метод окрашивания аурамином-родамином - один из методов, используемых для просмотра и изучение кислотоустойчивых бактерий (бациллы). Этот метод не только прост, но и также быстро использовать, что сделало его одной из лучших альтернатив Техника Циля-Нильсена сегодня.

Требования

  • Аурамин Родамин Пятно
  • 0,5% Кислый спирт
  • 0,5% Перманганат калия
  • Стекло микроскопа
  • Флуоресцентный микроскоп (составной микроскоп)
  • Стойка для окрашивания
  • Стойка для сушки
  • Вода
  • Горелка Бунзена
  • Лабораторная палочка для сжигания

сделайте небольшой мазок в центре предметного стекла

Пропустите предметное стекло над пламенем горелки Бунзена 3, чтобы 4 раза для термофиксации

Залейте предметное стекло красителем аурамином и дайте ему высохнуть. постоять 15 минут - накрыть мазок пятном

Промыть мазок дистиллированной водой до полного исчезновения. цвет остается - не используйте хлорную воду

Залейте предметное стекло кислотным спиртом примерно на 3 минут

Промойте предметное стекло дистиллированной водой

Залейте предметное стекло перманганатом калия для около 2 минут

Промыть дистиллированной водой и дать высохнуть

Наблюдать под микроскопом, начиная с низкого увеличение, а затем большое увеличение


Наблюдение

Если в образце присутствуют кислотоустойчивые бациллы, студенты они будут иметь желтый или ярко-оранжевый цвет с темным фон.

Примечания

Аурамин-родамин (первичный краситель) флуорохромный краситель, имеющий сродство к кислотоустойчивым организмам. Когда это входит контактирует с клеточной стенкой бактерий, образует комплекс с миколичными кислота, присутствующая в клеточной стенке.

Термофиксация улучшает этот процесс, делая его трудно обесцвечивать при использовании кислого спирта. Здесь вторичный Используемое краситель / противодействующий краситель - перманганат калия.

Эта морилка используется для изготовления другой нефлуоресцентный мусор, чтобы его нельзя было увидеть при просмотре под микроскоп.Следовательно, могут быть подвергнуты только клетки, поглощающие первичное пятно. видимый.


Метод окрашивания по Граму используется для различение грамположительных и отрицательных бактерий. Эта техника имеет также был использован для изучения мокроты.

Требования

  • Образец (мокрота)
  • Предметное стекло
  • Горелка Бунзена
  • Составной микроскоп (яркий поле)
  • Жгучая палочка / ватный тампон

Процедура

  • С помощью обжиговой палки или ватным тампоном, возьмите небольшое количество образца и сделайте мазок по центру предметного стекла - попробуйте сделать тонкое предметное стекло
  • Поставьте предметное стекло на сушку стойку и дайте высохнуть
  • Пропустите слайд над пламеньте несколько раз, но избегайте перегрева.Просто пропустите его над пламенем несколько раз - тепловая фиксация
  • Залить мазок кристаллический фиолетовый и дайте постоять около минуты
  • Наклоните слайд и промойте дистиллированной водой
  • Залейте предметное стекло йод примерно на одну минуту
  • Наклоните задвижку и промойте вода
  • Наклоните затвор и примените спирт капля за каплей, пока он не станет прозрачным (95% этиловый спирт / ацетон)
  • Промыть водой
  • Залейте предметное стекло сафранин около минуты
  • Наклоните задвижку и промойте дистиллированная вода
  • Промокните предметное стекло насухо
  • Просмотр под микроскопом при высокой мощности (масляная иммерсия)


Наблюдение

При просмотре под микроскопом студенты могут наблюдать различные типы клеток (плоский эпителиальный, мононуклеарные клетки, респираторные эпителиальные клетки и т. д.) и другие клетки, такие как Streptococcus pneumoniae, стафилококки и Hemophilus influenzae, если они присутствуют.

Хотя клетки тела могут выглядят розоватыми, микроорганизмы - темнее, сохраняя основной цвет из-за их толстого пептидогиканового слоя на их клеточной стенке.

* Наблюдая и изучая типы клеток и микроорганизмов, присутствующих в мазке с помощью окрашивания по Граму, можно расскажите о типе инфекции у пациента.


Связанные: Мазок крови, общий анализ мочи, культура при микроскопии и чувствительность

Анализ лейкоцитов

Возврат к приложениям микроскопии

Возврат из микроскопии мокроты в MicroscopeMaster Research Home


Ссылки

Аннетт Джепсон (2008) Лабораторные методы для диагностики туберкулеза - что доступно?

D. J. Flournoy (1999) Интерпретация мокроты Отчет об окрашивании по Граму.

http://www.sciencedirect.com/topics/medicine-and-dentistry/acid-fast

http://www.stoptb.org/wg/gli/assets/documents/TB%20MICROSCOPY%20HANDBOOK_FINAL.pdf

Бесплатные карточки о Micro Lab 3 и 4

9027 1 Heat Fix бактериальных бактерий наносится тонкой пленкой на чистое предметное стекло микроскопа
Вопрос Ответ
Теория бактериального окрашивания Бактериальные красители, являющиеся ОСНОВНЫМИ ПЯТНАМИ, и большинство бактериальных клеток имеют отрицательно заряженную поверхность
Основные пятна Положительно заряженные пятна
Процедура очистки мазков на
Процедура для бактериальных мазков (2) Слайды с этикетками
Процедура для бактериальных мазков (3) Подготовка мазков
Процедура для бактериальных мазков (4) Термофиксирующие слайды
Убивает бактериальные клетки, прикрепляет клетки к поверхности предметного стекла, обеспечивает лучшее проникновение красителя
Простая процедура окрашивания (1) Окрашивание кристаллическим фиолетовым, заливка предметного стекла в течение 60 секунд
Простая процедура окрашивания ( 2) Полоскание
Простое окрашивание процедура (3) Промокание с помощью бибулярной бумаги
Простая процедура окрашивания (4) Наблюдайте и сделайте репрезентативный рисунок; размер измерения
Почему толстые / плотные мазки с меньшей вероятностью могут обеспечить хорошую подготовку мазка для микроскопической оценки? Плотные мазки уменьшают количество света, которое может проходить, что затрудняет визуализацию морфологии отдельных клеток
Почему нужно быть осторожным, чтобы не перегреть мазок во время процесса термофиксации? Перегрев предметного стекла может исказить морфологию бактерий
Можно ли использовать простые методы окрашивания для идентификации не только морфологических характеристик микроорганизмов? Да, простое окрашивание показывает не только морфологию (форму и расположение клеток), но и размер клеток, который не является частью морфологии клеток.
Будет ли отличаться невозможность термической фиксации E.coli на слайде от правильной подготовки слайда? Немного. E.coli по-прежнему будет окрашивать, но не так хорошо, как если бы она была зафиксирована нагреванием.
Лаборатория 3 использованных микробов: Staphylococcus epidermis, Bacillus subtilis и моя чистая культура
Лаборатория 4 использованных микробов: Staphylococcus epidermis, Escherichia coli и мой чистый образец бактерий
Процедура окрашивания по Граму (1) Первичное окрашивание: Кристаллический фиолетовый и дайте постоять 60 секунд, затем промойте дистиллированной водой
Процедура окрашивания по Граму (2) Протравливание: йод по Граму и дать постоять в течение 60 секунд, затем промыть дистиллированной водой
Процедура окрашивания по Граму (3) Обесцвечивающее средство: 95% спирт, держите предметное стекло под углом 45 градусов и капля за каплей, пока не станет почти прозрачным
Процедура окрашивания по Граму (4) Контрастное окрашивание: сафранин в течение 60 секунд, затем промыть дистиллированной водой
Сафранин простое окрашивание, превращается в G-оранжево-розовый
Процедура окрашивания по Граму (5) Промокание с помощью бибулярной бумаги
Цвет окрашивания клеток G + Фиолетовый
Фиолетовый
цвет оранжево-розовый
Каковы преимущества процедур дифференциального окрашивания перед простой техникой окрашивания? Дифференциальное окрашивание позволяет отличить G + от G- клеток, тогда как простое окрашивание показывает только размер и морфологию клеток.
Цель первичного окрашивания в процедуре дифференциального окрашивания? Придать свой цвет всем клеткам
Назначение контрастного окрашивания в процедуре дифференциального окрашивания? Если первичное пятно смывается, контрастное пятно впитывается.